福立仪器|怎么正确使用维护液相色谱柱？详情解析看这儿→

1.准备工作

检查色谱柱：确认色谱柱类型（如C18、C8等）与实验条件匹配，检查柱效标签是否在有效期内。

保存溶剂检查：确保色谱柱当前保存溶剂与待用流动相兼容（如甲醇→甲醇/水体系可直接使用）。

工具准备：准备两通（用于预冲洗）、LC5190适配高压接头。

2. 系统预冲洗（可选，避免残留污染）

用两通代替色谱柱连接管路，以低流速（0.5-1 mL/min）冲洗系统5-10分钟，排出管路杂质和气泡。

3.安装色谱柱

连接方向：色谱柱标注流动方向（箭头→），确保流动相从柱头流向柱尾（反向安装可能降低柱效）。

管路连接：使用LC5190高压接头将色谱柱（L75管件自带高压手拧接头）与进样器和检测器连接，拧紧前先把管路向后拉一下，再用手拧紧后即可。

检查泄漏：启动输液泵，待流速到达设定值，压力上来后，观察接口处是否漏液，必要时停泵后重新拧紧。

4.平衡流动相

用初始流动相（如5%有机相）以实验流速冲洗20-30分钟，直至基线稳定、压力波动0.1Mpa以内。

方向与流动相兼容性

流向不可逆：色谱柱填料装填方向固定，反向使用可能导致柱床塌陷或峰形异常。

溶剂切换梯度：若保存溶剂（如乙腈）与流动相（如95%水相）差异大，需逐步过渡（如乙腈→乙腈/水→95%水），避免突然高水相导致填料收缩。

避免物理损伤

轻拿轻放：色谱柱填料受震动易产生空隙，导致峰分叉或柱效下降。

压力限制：运行压力不超过色谱柱标注的最大耐受压力（通常≤40Mpa），高压可能压碎填料。

防止污染与堵塞

样品过滤：所有样品必须经0.22μm滤膜过滤，防止颗粒物堵塞柱头筛板。

缓冲盐冲洗：使用缓冲盐流动相后，需用5%-10%甲醇/水冲洗30分钟，避免盐析堵塞。

泄漏与压力异常处理

漏液检查：若压力持续下降，可能接口未拧紧，需重新安装或更换高压接头。

压力骤升：可能柱头堵塞，超声柱头筛板或更换柱头筛板，如果实在不行可以尝试反向冲洗（需确认柱耐受性）。

保存与维护

长期保存：冲洗后，短期保存使用甲醇即可，长期保存使用70%甲醇水，再两端密封，避免干燥。

定期测试柱效：使用标准样品（如萘、甲苯）测试理论塔板数，柱效下降20%以上需再生或更换。