GPC与光散射检测器联用测定肝素钠的绝对分子量及分子量分布
2022-03-14 10:22:37 东曹（上海）生物科技有限公司
肝素钠首先从肝脏发现而得名，由葡萄糖胺、L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂。它也存在于肺、血管壁、肠粘膜等组织中，是动物体内一种天然抗凝血物质。现在主要从牛肺或猪小肠黏膜提取。肝素作为一种抗凝剂，是由二种多糖交替连接而成的多聚体，在体内、体外均具有强大的抗凝作用。临床上主要用于血栓栓塞性疾病、心肌梗死、心血管手术、心脏导管检查、体外循环、血液透析等。
本应用是将HLC-8420GPC凝胶渗透色谱系统和LenS3多角度光散射检测器联用，采用TSKgel G3000SWXL色谱柱对肝素钠的绝对分子量及分子量分布进行了表征。
分析条件
仪器: HLC-8420GPC & LenS3
色谱柱: TSKgel G3000SWXL (7.8mmI.D.×30cm, 5μm)
流动相: 0.2 M Na2SO4（pH 5.0）
流速: 0.5 mL/min
样品浓度: 4.87 mg/mL
进样量: 100 μL
温度: 40℃
标准品: 肝素钠
图1 多检测器测试谱图
（紫色曲线为示差(RI)检测器信号，红色曲线为10°角光散射(LALS)检测器信号，蓝色曲线为90°角光散射(RALS)检测器信号，绿色曲线为170°角光散射(HALS)检测器信号）
图2 绝对分子量及RI随流出时间曲线
（紫色曲线为示差(RI)检测器信号，绿色曲线为绝对分子量，随流出时间曲线）
图3 分子量分布和累积分布曲线
（黄色曲线为分子量分布曲线，紫红色曲线为累积分布曲线）
【电子书】生物大分子液相色谱分离技术读本
GPC与光散射检测器联用测定普鲁兰多糖绝对分子量及其分布
参考2020版中国药典采用G3000PWXL色谱柱分析聚乙二醇
已获批ADC药物的纯化工艺及可适用的TOYOPEARL填料
参考GB/T 31408-2015液相色谱法测定染发剂中非那西丁
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