SPE1000-HPLC法测定水果蔬菜茶叶中吡虫啉

1.1仪器与试剂

SPE1000全自动固相萃取系统（莱伯泰科公司）；

LC600 二元高压梯度高效液相色谱（莱伯泰科公司）；

M64多通道平行浓缩系统（莱伯泰科公司）；

吡虫啉标准溶液：100μg/mL；

乙腈（色谱纯，Fisher）；

氢氧化钠（分析纯，北京试剂厂）；

氯化钠（分析纯，北京试剂厂）；

溶液A（20mmol/L NaOH、NaCl饱和溶液）：称取0.8g NaOH 于100mL烧杯中，加入少量水充分溶解后，再加入氯化钠使其饱和，然后倒入1000ml容量瓶中，再用饱和氯化钠水溶液定容至刻度；

溶液B（20mmol/L NaOH溶液）：称取0.8g  NaOH 于100mL烧杯中，加入少量水充分溶解后，倒入1000ml容量瓶中定容；

固相萃取柱：LabTech C18 500mg/ 6 mL 。

1.2  标准工作液的配制

标准工作液：取吡虫啉标液100μL加入10mL棕色容量瓶中，用乙腈定容配制成1μg/mL标准贮备液。

1.3 实验过程

1.3.1  提取

1.3.1.1 水果蔬菜样品

将水果蔬菜打碎，称取10g试样（精确至0.01g）于100mL离心管中，加入20mL乙腈，用均质器在15000 r/min匀浆提取1min，加入5g氯化钠，再匀浆提取1min，将离心管放入离心机，在3000 r/min离心5min，取上清液10mL（相当于5g试样量）加入60mL样品管中，用M64在40℃，5psi氮吹浓缩至近干，加10%乙腈水溶液2mL入样品管中，涡旋振荡30s充分溶解，待净化。

1.3.1.2 茶叶样品

茶叶样品用固体样品粉碎机粉碎，称取5.0g试样加入50mL乙腈，振荡提取1h，用离心机4000r/min离心5min，取40mL上清液入100mL具塞量筒中，加入配制好A溶液40mL，剧烈震荡1min，分层，取出乙腈层20mL，加入60mL样品管中，用M64在40℃，5psi氮吹浓缩至近干，加10%乙腈水溶液2mL入样品管中，涡旋振荡30s充分溶解，待净化。

1.3.2  全自动固相萃取净化过程

在1.3.1水果蔬菜样品中加入200μL标准贮备液，在茶叶样品中加入250μL标准贮备液，放入SPE1000样品架上，并装上C18固相萃取柱按图1方法进行第一步净化，用10mL收集管收集，收集液用流动相定容到1mL，待检测。

图1  吡虫啉C18固相萃取方法

1.3.3 HPLC液相色谱分析

色谱柱：C18，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5μm，或性能相当者；

流动相：0.1%磷酸水溶液（V/V）：乙腈=8:2；

流速：1.0mL/min；

紫外检测波长：270nm；

柱温：35℃；