别乱买!宝藏级种草系列之液相色谱分离模式汇总

2024-05-13 14:10:37, 市场部 艾杰尔-飞诺美(Agela & Phenomenex)


俗话说,工欲善其事必先利其器。选对实验耗材,让分析过程事半功倍!飞诺美特别推出实验室色谱耗材#宝藏级种草指南,希望大家吃下这波色谱技术红利的同时,丢掉内耗,成为实验室超级买手!

本期,首先为大家汇总了#液相色谱不同分离模式的选型指南:

手性色谱

手性色谱是指使用手性HPLC柱分离对映体,手性HPLC柱填充有手性固定相。目前,手性识别模型多是基于Dalgliesh在1952年提出的“三点相互作用”(Three-point interaction)理论:在一对对映体和手性选择剂之间,为了形成稳定性不同的非对映体分子络合物(Molecule associates)而达到手性分离的目的,至少需要三个同时发生的分子之间的相互作用力起作用。而且,三点作用力中至少有一个必须是立体化学相互作用。

一般来说,正相溶剂通常用于手性HPLC分离,但是反相溶剂也可以与某些类型的手性固定相一起使用。大约60%的药物是手性的。用于手性HPLC色谱柱的常见手性固定相有多糖、配体交换、蛋白质、环糊精、冠醚和Pirkle-brush型。

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Lux手性液相色谱柱,拥有8种涂敷型和键合型固定相,为其他手性选择剂提供广泛的对映选择性。

LuxChirex

Lux系列作为苯基氨基甲酸酯类衍生物多糖手性柱具有以下特点:

具有类似螺旋的空间结构

C=O,N-H与样品分子间可形成氢键,C=O与其还可能存在偶极-偶极和π-π作用

对映体选择性受苯基取代基的影响,推电子基团(如甲基)与吸电子基团(卤素)表现不同的选择性。通过不同的偶极作用,苯环上的不同取代基可以说产生不同的手性识别能力;一般来说,3,4位或3,5位取代的二甲基及二氯基苯基氨基甲酸酯对大多数手性化合物表现出了比单取代衍生物更好的手性识别能力

尺寸排阻色谱柱

尺寸排阻色谱法(Size Exclusion Chromatography, SEC),也被称为凝胶过滤色谱或凝胶渗透色谱,包括使用水相流动相体系分析生物高分子化合物以及有机相流动相体系用于分析高分子聚合物等不同模式。在尺寸排阻色谱中,使用一种多孔性凝胶填料,如琼脂糖或聚合物凝胶作为固定相。这些凝胶具有不同的孔径大小,从而形成分子筛。样品溶液在柱中进行分离时,根据大分子药物的流体动力学体积进行分离的技术,因此对于大分子的聚集体分析尤为适用。

使用飞诺美专为体积排阻色谱设计的SEC色谱柱增强您的分析能力。我们的尺寸排阻色谱柱提供精确的分子尺寸分析,确保分析尺寸排阻色谱的准确结果。探索飞诺美专为满足您的色谱分离需求而定制的HPLC SEC技术的效率和可靠性。

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PolysepBiozen SEC-2Biozen Dsec-7

Phenogel

HILIC液相色谱

HILIC是一种特别适用于极性有机化合物的分离模式。没有HILIC HPLC色谱柱就无法保留这些化合物。使用反相方法保留这些极性化合物通常很困难。

HILIC HPLC/UHPLC色谱柱在硅胶表面形成并保留了富水层,这有助于极性化合物与固定相的相互作用,从而提高保留时间。

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Luna NH2Luna HILICBiozen Glycan

Luna Omega Sugar

离子交换色谱

离子交换(IEX)色谱涉及带电固定相和带相反电荷的移动分析物之间的相互作用。在阳离子交换色谱中,带正电荷的分子被带负电荷的固定相吸引。同样,在阴离子交换色谱中,带负电的分子被带正电的固定相吸引。

离子交换(IEX)色谱适用于多种化合物,如酸性(阴离子)和碱性(阳离子)小分子,直至多肽和蛋白质。

离子排阻色谱

离子排阻(IEC)色谱法是通过离子交换树脂分离混合物中成分的过程,该树脂排除高度离子化的化合物,保留轻微离子化或未离子化的化合物。离子排阻(IEC)色谱使用磺化固定相保留有机酸、碳水化合物、糖、淀粉和低聚糖。

从药物配方和赋形剂分析到成品食品的质量控制测试,再到生物乙醇生产的发酵监控,离子排阻提供了必要的准确和可重现的分析结果。

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Rezex

正相色谱

正相色谱(NPC)用于分离强疏水性或者强极性化合物,这些化合物和基质被反相强烈保留或者不保留,在水性流动相中溶解度极小。正相固定相通常包含主要通过偶极-偶极和氢键相互作用与分析物相互作用的极性官能团。

正相固定相通常包含极性官能团(硅胶硅羟基、氨基和氰基),主要通过偶极-偶极和氢键相互作用与分析物相互作用。

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Luna CNLuna NH2Luna Silica

反相色谱

作为高效液相色谱/UHPLC分离模式最常见的原理,反相色谱可保留具有良好疏水性的化合物。反相高效液相色谱保留这些化合物涉及每种目标化合物与固定相和流动相之间的疏水和范德华力等相互作用。

反相色谱中使用的固定相通常由不同长度的碳链结构(如C18、C8和C4)或强疏水性聚合物(如苯乙烯二乙烯苯)组成。

C18 HPLC色谱柱是最常见的色谱柱,因为它们具有出色的疏水分离能力

与C18色谱柱相比,C8色谱柱的反相保留相对较弱

C4和C5 HPLC色谱柱通常用于分离蛋白质等大分子

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