特色方案｜HPLC方法测定阿奇霉素

本文建立了阿奇霉素的 HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱Shim-pack Scepter C18(4.6×250mm,5μm)分析阿奇霉素，阿奇霉素峰及其杂质峰之间的分离度均满足《中国药典》要求。此方法可为阿奇霉素的检测提供参考。

LC-2040C一体机；

色谱柱：Shim-pack Scepter C18（4.6×250 mm，5 μm；P/N：227-31020-06)；

SHIMSEN Arc Disc HPTFE 针式过滤器（P/N：380-00341-05）；

LC/MS 认证样品瓶 LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；

SHIMSEN Pipet 移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；

SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；

SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。

色谱柱：Shim-pack Scepter C18 (4.6×250 mm， 5 μm )

流动相 A：50mM 磷酸氢二钾（磷酸调节 pH=8.2） /乙腈=45/55

流动相 B：甲醇

柱温：50℃

检测波长：210nm

流速：1.25mL/min

进样量：50μL

精密量取 0.1mL 供试品溶液，置 20mL 容量瓶中，加稀释剂[磷酸二氢铵溶液（磷酸二氢铵 1.73g，加水溶解并稀释至 1000mL，用氨试液调节 pH 值至 10.02） -甲醇-乙腈（7:7:6） ]定量稀释并定容。

取本品 0.1g 精密称定，置 10mL 容量瓶中，加稀释剂[磷酸二氢铵溶液（磷酸二氢铵 1.73g，加水溶解并稀释至 1000mL，用氨试液调节 pH 值至 10.02） -甲醇-乙腈（7:7:6） ]定量稀释制成10mg /mL溶液。

精密量取 1mL 对照溶液，置 5mL 容量瓶中，加稀释剂[磷酸二氢铵溶液（磷酸二氢铵 1.73g，加水溶解并稀释至1000mL，用氨试液调节 pH 值至 10.02） -甲醇-乙腈（7:7:6） ]定量稀释并定容。

取杂质 A 对照品0.005g和杂质 S 对照品 0.005g 精密称定，置100mL 容量瓶中，加稀释剂[磷酸二氢铵溶液（磷酸二氢铵 1.73g，加水溶解并稀释至 1000mL，用氨试液调节 pH 值至 10.02） -甲醇-乙腈（7:7:6）]定量稀释制成 0.05mg /mL 溶液。

精密量取1mL 杂质 A/S 对照品溶液，加入阿奇霉素系统适用性对照品中，振摇使其溶解，制成20mg /mL 溶液。

按照上述色谱条件（ 1.2）进行采集， 系统适用性溶液色谱图、 对照品溶液色谱图和样品色谱图如下：

对照溶液：

本文参考《中国药典》中色谱条件，并对其条件进行优化，最终建立了阿奇霉素的 HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18 (4.6×250 mm，5μm )分析阿奇霉素，阿奇霉素峰及其杂质峰之间的分离度均满足《中国药典》要求。此方法可为阿奇霉素的检测提供参考。