2023-10-23 21:21:14, 天美 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
要 点
01
光学显微镜简介
在本文中,我们将介绍一些最常见的光学显微镜术语,包括正置显微镜和倒置显微镜,反射和透射照明模式以及明场和暗场照明模式,并讨论了它们在不同研究领域的适用性。
02
正置显微镜与倒置显微镜
选择显微镜时的一个重要考虑因素是物镜相对于样品的位置。在正置显微镜中,物镜位于样品上方;而在倒置显微镜中,物镜位于样品下方。尽管在结构和外观上存在差异,但它们对样品具有相同的成像能力,可适用于不同的样品类型。
图1 正置和倒置显微镜中物镜相对于样品台和样品的方向。
03
反射照明与透射照明
由于可以用显微镜观察到从不透明半导体芯片到半透明组织培养物等一系列光学性质各异的样品,因此大多数用户可根据具体样品选择反射或透射照明模式。如图2所示,此为正置显微镜两种照明模式下的光路示意图。除此之外,倒置显微镜也有这两种照明模式。
图2 有反射(红色)和透射(蓝色)照明模式的正置显微镜。
图3 固定在载玻片上的脂肪肝组织切片的反射和透射照明。
04
明场照明与暗场照明
光学显微镜中有两种主要的照明模式,明场和暗场。图4所示的反射明场照明模式中,光线通过半镀银反射镜反射到物镜中心。在反射暗场照明模式中,接入挡光板,反射镜变为全镀银环形反射镜,使光束沿物镜边缘向下。
图4 显微镜内反射明场照明模式和反射暗场照明模式的差异。
图5 A) 明场和暗场入射角的差异;B) 暗场缺陷散射光的检测。
图6 使用明场模式和暗场模式观察固定在载玻片上的硅藻。
05
结 论
正置显微镜和倒置显微镜,反射和透射照明模式以及明场和暗场照明模式是光学显微镜中最常见的术语。在进行光谱分析之前,针对不同类型的样品可选择不同照明模式。这不仅确保样品的可视化,并且可以使用户在成像之前找到样品上感兴趣的特征。
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