2023-10-12 14:19:30, 赛默飞生命科学 赛默飞世尔科技生命科学产品
蛋白Marker或蛋白标准品是生化实验中最常用的试剂之一,用来估计通过凝胶电泳(例如 SDS-PAGE)分离的蛋白质的大小,是蛋白表达、纯化和分析实验离不开的,也是大多数实验室日常配备的基础试剂之一。
Thermo Scientific PageRuler预染蛋白Marker是市面上最早推出的颜色明亮、条带清晰的预染蛋白marker之一,自2000年初第一代产品上市以来,深受广大科研人员信赖:
20多年深厚经验
2万篇引用文献
数百万忠实用户
作为人见人爱的经典产品,PageRuler预染蛋白 Marker具有以下突出优势:
颜色清晰,易于观测
条带锐利,分布均匀
上样量少,高性价比
PageRuler预染蛋白marker口碑爆棚、好评如潮:
“PageRuler预染蛋白marker就是亮,之前试过别的品牌,都没有PageRuler条带锐利,现在都固定用它了”
“说明书推荐上样5 μL,但我们平时省着用上2 μL,效果也一样很棒”
“条带很清晰、好分辨,转膜效率也优秀,性价比冠军了”
“用起来很方便,用量也挺省的,每次搞活动我们实验室都囤一些,大包装平均下来非常划算”
“26616,YYDS”
“Pageruler系列蛋白marker性质稳定,条带清晰,准确,锐利,大小精准,无论做考染还是wb都非常理想”
干货时间
蛋白marker常见问题解析
蛋白marker是日常实验很常用的试剂,下面我们来一起看看使用过程中都有哪些常见问题吧。
01
为什么在不同凝胶体系中,蛋白分子量标准的迁移特性会有所不同?
当相同的蛋白质在不同的SDS-PAGE缓冲系统(如 Bis-Tris 和 Tris-甘氨酸)中运行时,蛋白质的迁移率会产生轻微差异。每种 SDS-PAGE 缓冲系统均具有不同的 pH 值,因而会影响蛋白质的电荷及其与 SDS 的结合能力。蛋白质迁移率的变化程度在天然蛋白质中通常很小,但对于非典型或化学修饰的蛋白质,如预染蛋白Marker,其变化更为明显。
02
为什么同一蛋白Marker在不同凝胶体系中的分子量会不一样?如果我想知道精准蛋白分子量该怎么办?
由于问题1中所述的蛋白迁移特性,所有预染蛋白Marker的表观分子量都会因缓冲条件的不同而发生变化,所以应根据所用凝胶体系使用相匹配的表观分子量,来更准确地定位您的目标蛋白。如需查看赛默飞蛋白Marker在各凝胶体系中的表观分子量,请见产品说明书中的迁移模式示意图(Migration Patterns)。
如果需要精准测定目标蛋白的分子量,推荐使用非预染蛋白Marker。两大类蛋白Marker的推荐使用情形对比请见下表:
03
请问PageRuler预染蛋白marker使用时有什么注意事项吗?
由于Marker中含有SDS,其在低温下易析出,因此marker在上样前,需要在室温进行回温(如20-25℃回温5-10分钟),并在上样前要充分轻柔混匀;避免低温操作,可有效减少异常条带的出现;
上样时使用无蛋白酶的吸头(如高压灭菌过的吸头)进行上样,避免蛋白酶引起蛋白降解,从而导致不可逆的条带弥散;
对于小胶(如8cm x 8cm),保证marker上样量在1.0mm厚的胶中上样至少5 μL,1.5mm厚的胶上样至少10 μL;
切勿煮沸或高温孵育。
有奖互动
请在评论区留言,分享PageRuler蛋白marker使用感受,或者你的WB小窍门,点赞前十名即可获得WB孵育盒或胶铲一份。
*活动截至10月18日下周三,10月19日将收集邮寄信息,请关注评论区回复。
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