参照GB/T40486-2021测定蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量

2023-09-17 14:44:52 东曹(上海)生物科技有限公司


蜂毒肽(Melittin)是蜂毒的主要成分和主要生物活性物质,约占蜂毒干重的40%-50%,是由26个氨基酸残基组成的多肽,相对分子量为2846。蜂毒肽呈强碱性,易溶于水,是目前人类所知抗炎性最强的物质之一。此外,蜂毒肽还具有抗炎、抑菌、抗病毒、抗风湿性关节炎等多种药理活性。

本应用参照国标GB/T 40486-2021《蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量的测定 高效液相色谱法》,采用C18色谱柱TSKgel ODS-100Z(4.6 mm I.D.×15 cm, 5 μm)对蜂毒肽标准品进行了定量分析,其浓度-峰面积的校正曲线优异,可满足上述国标中测试要求。

1. 溶液的配制   

标准曲线的配制:称取适量蜂毒肽标准品,用纯水溶解至约1 mg/mL, 并用纯水逐级稀释至20 μg/mL, 50 μg/mL, 100 μg/mL, 200 μg/mL, 500 μg/mL, 1000 μg/mL作标准曲线。

流动相A:0.1%三氟乙酸水溶液

流动相B:0.08%三氟乙酸乙腈溶液

2. 分析条件   

仪器:Thermo Ultimate3000

色谱柱:ODS-100Z(4.6 mmI.D.×15 cm,5 µm)

流速:0.8 mL/min

柱温:25℃

进样量:5 µL

检测器:UV@220 nm

3. 分析结果   

图1  蜂毒肽的色谱图(约993.29 μg/mL)

图2  蜂毒肽浓度-峰面积校正曲线

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