【产前诊断指南发布】如何完善质控，基于STR排除母源污染必不可少！

2023 年 8 月 23 日，由全国产前诊断专家组牵头，北京协和医院等数家产前诊断机构共同制定的《染色体微阵列分析技术在产前诊断中的应用指南（2023）》在《中华妇产科杂志》正式发布。该指南完整体现了当前中国专家团队对于染色体微阵列分析技术（CMA）技术产前诊断应用的经验集成、专业思考和指导意见，将推动全国胎儿染色体及基因组疾病产前诊断工作的规范性和先进性得到进一步的提升。

该指南针对 CMA 技术在产前诊断临床应用的重要方面，从临床应用指征、检测的质量控制、数据的分析解读、诊断报告撰写、检测前后遗传咨询等工作的规范开展进行了详细的阐述和介绍。其中，在质量控制方面，指南提出完善的质控体系是 CMA 准确诊断的核心，强调了确定标本胎源性的重要性，所有绒毛或者怀疑有母血污染的脐血及羊水标本检测前需要对胎儿样本进行 STR 分析以排除母源污染（MCC）。此前，《低深度全基因组测序技术应用于产前诊断中的专家共识》也明确提出建议，可使用 STR 检测对产前样本进行 MCC 判断。

提到 STR （Short Tandem Repeats，短串联重复序列 ），大家对其并不陌生。它是由 2-7 个碱基对作为核心单位，串联重复形成的，常见于非编码区的内含子中。由于重复单位和重复次数不同，STR 在不同的种族和人群中的分布，有很大的差异性，这就构成了 STR 的遗传多态性。个体在多个 STR 位点的分型组合，就构成了这个个体独特的基因档案。目前，STR 检测被广泛用于法医学个体识别、动植物物种鉴定、细胞系鉴定、器官移植配型等领域。尤其在产前诊断方面，STR 检测除了可用于 MCC 排查而外，还可用于单亲二体疾病辅助诊断、非整倍性染色体疾病快速诊断等。

定量荧光 PCR（quantitative fluorescence PCR，QF-PCR）基于 PCR 扩增和毛细管电泳分离技术，能够定性、定量分析 STR 的多态性，是检测 STR 位点常用的技术手段之一。在实验操作方面能够在一个多重 PCR 反应中涵盖十几个到二十几个 STR 位点，操作方便，覆盖位点全面，可以实现精确的拷贝数和染色体来源分析。另外需要的 DNA 样本很少， 低至 1 ng 即可进行实验。与其他分子诊断技术相比，QF-PCR 技术可半自动化和批量检测，24～48 h 内能得到结果，在高通量检测、价格低廉、可质量控制等方面具有突出优势，有望解决产前诊断技术资源的“缺口”问题。

基于 PCR 扩增和毛细管电泳分离

进行 STR 检测工作流程

目前，常见的介入性产前诊断技术包括羊膜腔穿刺、绒毛穿刺、经皮脐血穿刺等。由于这些穿刺过程不可避免的经过母体，存在母源细胞污染（maternal cell contamination，MCC）的风险，再加上后续染色体检查和基因诊断存在基因扩增，这使得微量的母体组织污染都可能严重干扰诊断结果，造成严重的临床后果。因此母源污染检测是分子实验的基础，为了确保后续实验的准确性，在基因检测前，需要对羊水样本进行母源污染的检测，其中最常用的技术就是 STR 检测。选取具有高杂合度和高多态性的 STR 位点，应用多重 PCR 对羊水、脐血等进行母血污染鉴定，具有极强的灵敏度，结果准确可靠。

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