2024-04-26 14:05:54, 赛默飞生命科学 赛默飞世尔科技生命科学产品
蛋白定量是蛋白提取、纯化、标记和分析实验中的一个必要环节。根据所需的准确度以及待测蛋白样品的量和纯度,可以采用不同的方法来确定蛋白浓度,下表总结了常见蛋白定量方法及其优缺点。
表1. 蛋白定量方法的类型、优点、缺点和示例。
如何选择合适的蛋白定量方法
如上表所示,没有完美的蛋白定量方法,每种方法都有其优点和缺点。蛋白定量方法的选择通常基于蛋白定量方法与样品的兼容性。此外,还必须考虑样品中含有的潜在干扰物质,这些物质可能会影响某些方法的准确性、可重复性和孵育时间。大多数实验室往往根据样品和实验需求采用多种不同的蛋白定量方法。
总结来说,蛋白定量方法选择的重要考虑因素包括:
与样品类型和样品成分的兼容性
测定范围和所需样品量
蛋白间的差异
测试样品数量多少、是否足够快速和方便
是否配备所需的分光光度计或酶标仪
蛋白定量扛把子:BCA 蛋白定量试剂
由于准确性高、可以兼容多达 5% 的表面活性剂、蛋白间差异小、不需要特殊检测仪器等突出优点, Pierce BCA 蛋白定量试剂是好评如潮的经典,多年来深受国内外广大科研人员的欢迎。
为了满足中小通量蛋白定量实验的需求,现重磅推出【小包装】经典款Pierce BCA 蛋白定量试剂:
货号:A65453
规格和价格:100mL,500孔;飞享价到手350元
线性范围:20 ~ 2000 µg/mL
检测下限:5 µg/mL
图1. 小包装BCA蛋白定量试剂(货号A65453,500T)
随着小包装新品的推出,Pierce BCA 蛋白定量试剂家族越来越壮大了:最快15分钟搞定蛋白定量的免稀释系列BCA、常规规格的BCA,和最新推出的小包装BCA试剂。为了您的选择方便,下表简单总结了怎么快速确定哪款Pierce BCA 蛋白定量试剂适合您:
表2. Pierce BCA 蛋白定量试剂选择指南
除了自主选择外,也欢迎随时联系我们的技术支持和销售同事帮您选择合适的蛋白定量试剂。
Thermo Scientific Pierce BCA
蛋白定量分析试剂盒操作指南
本指南介绍了使用酶标仪检测总蛋白浓度的实验方法。酶标仪检测的操作更加简便,且需要的蛋白样品的体积较小(10 ~ 25 µL)。如需了解完整的实验方案,请查阅试剂盒中的说明书或前往赛默飞官网下载电子版说明书。
标准品和工作液的制备
A. 梯度稀释牛血清白蛋白(BSA)标准品
按照表 1 制备一组蛋白质标准品。将一安瓿的牛血清白蛋白标准品(BSA)稀释到几个干净的小瓶中,建议使用与待测样品相同的稀释液。
BCA蛋白定量实验常见问题
Q
哪些物质会干扰BCA定量分析的结果?
A
部分干扰 BCA 定量分析的物质包括还原性物质、螯合剂以及强酸或强碱,即使浓度很低也可能会影响定量的结果:
另外,一些物质对 BCA 定量分析方法的干扰程度较低,当其在原始样品中含量低于某特定浓度时,仅对结果造成微小影响(可耐受)。此外,多种干扰物质可能产生加和作用,例如当样品缓冲液中含有多种干扰物质时,即使其中单一干扰物质的浓度低于可兼容浓度,总体仍有可能对蛋白质的定量分析产生干扰。
小提示:Pierce 免稀释Rapid Gold快速 BCA试剂盒2个组分会分开发货,到货时间可能不一样,请耐心等待。
1. 黑色泡沫标准品架:常温发货,包装上显示货号为A57184,产品外形和功能如下图(标准品请见定量试剂盒):
2. 定量试剂盒:4度发货,包装上显示货号为A58701,产品图示如下:
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