2023-07-31 19:25:52, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
重楼,又称七叶一枝花,是百合科重楼属植物的泛称。本品味苦,性微寒,有小毒,归肝经,有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊之功效。常用于疔疮痈肿,蛇虫咬伤,跌扑伤痛,惊风抽搐。近年来,随着研究的深入,重楼的药用价值被日益重视。《中国药典》2020版第一部中重楼的含量测定参照高效液相色谱法测定,本报告参考药典的分析方法对重楼的含量进行测定。
实验部分
仪器
采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统:
▪ 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵
▪ SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
▪ SCION LC6310 柱温箱
▪ SCION LC6410 紫外检测器
液相色谱条件
样品的预处理
药材样品粉碎成末(过45目筛),精密称取2.500g置于具塞锥形瓶中精密加入乙醇25mL,称定重量,加热回流30分钟放冷,再称定重量,用乙醇补足减失的重量摇匀,过滤,取续滤液,待上机分析。
标准样品测定示例
▲ 标准样品的色谱图(浓度:400 mg/L)
重楼样品的分析结果
对药材样品重楼进行了含量的测定,结果在样品中未检测到重楼皂苷Ⅵ成分,其它皂苷成分均得到很好的分离 ,重楼中总皂苷的含量为0.46%。
▲ 重楼的色谱图
标准曲线
各种重楼皂苷成分在25~400mg/L标准混合液的浓度范围内,得到了R² ≥ 0.9998良好的线性关系。
▲ 重楼皂苷Ⅶ的标准曲线
▲ 重楼皂苷Ⅵ的标准曲线
▲ 重楼皂苷Ⅱ的标准曲线
▲ 重楼皂苷Ⅰ的标准曲线
系统适用性
(400 mg/L 标准混合液)
对系统适用性试验进行了确认,理论塔板数按重楼皂苷Ⅰ峰计算,结果得到色谱柱的理论塔板数达到药典规定值,如表所示。
重复性
(400 mg/L 标准混合液,n=6)
结论
使用SCION LC6000-UV对重楼中的重楼皂苷进行了测定,得到了良好的线性和重现性,理论塔板数满足药典要求,为重楼的品质分析提供了解决方法。
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