2023-07-26 19:27:15, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
关黄柏是一种常用中药,为芸香科植物黄檗的干燥树皮,性味苦,寒,归肾,膀胱经。具有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮的功效。用于湿热泻痢,黄疸尿赤,热淋涩痛,疮疡肿毒,湿疹湿疮等症状。关黄柏主要含小檗碱,巴马汀,药根碱,黄柏碱等活性成分,其中以小檗碱的含量最高。《中国药典》2020版第一部中关黄柏的含量测定参照高效液相色谱法测定,在此参考药典中的分析条件对关黄柏的含量进 行测定。
实验部分
仪器
采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统:
▪ 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵
▪ SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
▪ SCION LC6310 柱温箱
▪ SCION LC6410 紫外检测器
液相色谱条件
样品的预处理
[样品前处理]
关黄柏粉碎,过45目筛取本品粉末约0.2g,精密称定,置50mL容量瓶中加60%乙醇40mL,超声处理45min钟,放冷加60%乙醇至刻度,摇匀,滤过取续滤液,待上机分析。
标准样品测定示例
▲ 标准样品的色谱图(浓度:50 µg/mL)
关黄柏的分析结果
对关黄柏进行了含量的测定,其中大约含盐酸小檗碱1.61%,盐酸巴马汀0.60%,均满足药典要求。
▲ 关黄柏的色谱图
标准曲线
盐酸巴马汀和盐酸小檗碱在1~100µg/mL浓度范围内均得到R²=1.0000良好的线性关系。
▲ 盐酸巴马汀的标准曲线
▲ 盐酸小檗碱的标准曲线
重复性
(50 µg/mL 盐酸巴马汀和盐酸小檗碱混合标液,n = 6)
对50µg/mL标准溶液连续6次测定,考察了盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的保留时间和峰面积的重现性,均得 到了良好的结果。
系统适用性
(50 µg/mL 盐酸小檗碱标准溶液)
对系统适用性进行了确认,理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算,结果得到盐酸小檗碱的理论塔板数大于药典规定值,满足药典要求。
结论
使用SCION 赛里安 LC6000-UV对关黄柏中的盐酸巴马汀和盐酸小檗碱进行了测定,得到了良好的线性和重现性,理论塔板数满足药典要求,为关黄柏的品质分析提供了解决方法。
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