2023-07-06 19:50:19, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
柴胡属解表类中药,发散风热药,用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱垂、月经不调。具有解表退热、疏肝解郁、升举阳气作用。在此使用赛里安LC 6000-UV按照中国药典2020年版一部中的含量测定方法对柴胡中的柴胡皂苷a和柴胡皂苷d进行了分析测定。根据规定的实验条件确认了系统适用性,并对市售的柴胡样品进行了含量测定。
实验部分
仪器
采用包含以下模块的赛里安LC6000高效液相色谱仪系统:
▪ 集成六通道真空脱气的SCION LC6100四元泵
▪ SCION LC6210 高精度、低残留自动进样器
▪ SCION LC6310 柱温箱
▪ SCION LC6410 紫外检测器
液相色谱条件
样品的预处理
取本品粉末(过四号筛)约0.5 g,精密称定,置于具塞锥 形瓶中加入含5%浓氨试液的甲醇溶液25mL,密塞,30 °C 水温超声处理(功率200 W,频率40 kHz)30 min ;
滤过,用甲醇20mL分两次洗涤容器及药渣,洗液与滤液合并,回收溶剂至干。
残渣加入甲醇溶解,转移至5mL容量瓶中,加入甲醇至刻度,摇匀;0.45 μm滤膜过滤。
▲ 标准样品的色谱图(浓度:柴胡皂苷a,柴胡皂苷d各500mg/l)
▲ 柴胡测定样品示例图
标准曲线
在10~1000mg/L的浓度范围内,标准曲线线性良好,R²为0.9999。重现性也得到了良好的结果。
▲ 柴胡皂苷a标准曲线
▲ 柴胡皂苷d标准曲线
定量
重现性
柴胡皂苷a、d 各500 mg/L ,n=6
系统适用性
将标准样品(柴胡皂苷a, 500 mg/L)重复测定3次,理论塔板数结果如图所示,理论塔板数满足药典要求。
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