OD600:你的,我的,不一样

2023-06-16 14:51:02, SCIENTZ 宁波新芝生物科技股份有限公司


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01

OD600的应用


OD600是指在600nm波长处的吸光度,常常被用于表示细菌液体培养液中的细菌浓度。在细菌连续培养过程中,在不同的时间点检测菌液的OD600值,然后以时间为横坐标,OD600为纵坐标,描绘细菌的生长曲线。结合生长曲线,可以评估细菌所处的生长阶段,进而可以确定合适的诱导表达或收获的时间点。

1 杆菌生长曲线


02

OD600的检测原理

菌液是一种非均相的悬浊液,当入射光照射在菌液上时,光线被细菌(菌体)所散射,所以仪器检测到的“吸光度”实际上是由散射和吸收综合作用产生的,而不是如均相溶液中一般是由于溶质分子光吸收引起的。

当使用不同型号的设备来检测同一样本的吸光度时,可能会得到不同的OD600,这与仪器的光路设计有关。仪器的检测器与样本之间的距离(d)和检测器的大小(R)都会对吸光度产生影响。如图2所示,当检测器位于d1时,散射光可以被检测器接收到,此时吸光度较小,而当检测器位于d2时,光不能被检测器接收到,此时吸光度较大。

图2 菌液光散射的示意图(Stevenson et.al,2016)


03

使用不同的设备检测OD600

不同设备检测到的OD600不能直接比较。如图3所示,使用5个型号的设备(Biomat3ND 2000 AND 2000 BGenesysBeckman DU530)分别对不同稀释倍数(X1,X2,X5,X10)的样本进行OD600检测。结果显示不同的设备对同一样本的OD600检测值不一样。如果需要比较不同设备间的OD600值,需要先确定相同样品在不同设备上检测得到的吸光度值之间的恒定偏差或者比率,然后进行校准。

图3 不同型号的仪器OD600检测结果(Stevenson et.al,2016)

因此当进行细菌菌株筛选、培养基优化、添加剂评估等需要比较微生物生长曲线的研究工作时,最好选择同一型号的设备进行实验,保证实验条件的一致性。


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参考文献

Stevenson K ,  Mcvey A F ,  Clark I , et al. General calibration of microbial growth in microplate readers[J]. Scientific Reports, 2016, 6:38828.


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  新芝生物简介 

宁波新芝生物科技股份有限公司(股票代码:430685),总部位于宁波市国家高新区,是知名的生物样品处理设备提供商,也是国内超声波技术应用探索的先行者。新芝生物是一家为生物医药、医疗卫生、IVD、生物安全、食品安全、疾病预防与控制、检验检疫、环境保护及新材料研究等诸多领域提供相关科学仪器的高新技术企业。

依托强大的科研技术实力,公司在超声波细胞粉碎,萃取,分散,除垢、高压均质及超低温、冷冻干燥、基因细胞重组等技术领域积累了丰厚的经验,并研发了包括超声波破碎仪器、冷冻干燥设备、分子生物学仪器、实验室洁净设备、工业防垢除垢设备等产品。公司始终坚持业界前沿的技术研究和应用开发,致力于为客户提供先进的仪器设备和行业解决方案。

公司目前拥有宁波、杭州两地研发中心,拥有高水平研发人员数十人,专利60余项。公司曾承担卫生部重大科研项目,是国家发改委高技术产业化示范工程中心、科学仪器产业化基地、宁波企业工程(技术)中心。公司研制的高压气体基因枪一举打破国外技术垄断,填补国内相关领域空白,并荣获浙江省科技进步二等奖。2019年公司荣获了浙江省科技进步一等奖。2021年公司入选工信部第三批“专精特新小巨人”企业名单,同年被宁波市经济和信息化局认定为“宁波市制造业单项冠军示范企业”。 

公司高度重视品牌培育和市场开拓,为更好地服务客户,在全国各地建有30个办事处,办事处配备销售工程师和售后工程师,可随时满足客户需求,产品远销美、英、法、俄、日、韩等国家,公司已成为国内乃至全球知名的生物样品制处理设备研制专家。

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