特色方案|重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度分析

2023-06-12 20:45:28, 市场部 岛津(上海)实验器材有限公司


特色方案



SHIMSEN Ankylo SEC-150分析

重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度

摘要


本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm,3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液,理论塔板数为11853,主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的检测提供参考。


关键词:重组人碱性成纤维细胞生长因子  SHIMSEN Ankylo SEC-150  HPLC

实验部分



1.1    实验仪器及耗材

Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;

色谱柱:SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm,5 μm;P/N:380-01215-01);

纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器)

SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);

LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);

SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);

SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);

SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。

1.2    供试品溶液的制备

客户提供(1.0 mg/mL)。

1.3    分析条件

色谱柱:SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm,5 μm;P/N:380-01215-01)

柱温:28℃

检测器及波长:PDA 280 nm

流速:1.0 mL/min

进样量:10 µL

流动相:每1L含20 mM PB,0.5 M NaCl,2 mM EDTA-Na2的溶液(pH 7.0)

(十二水合磷酸氢二钠4.38 g,二水合磷酸二氢钠1.22 g,氯化钠29.22 g,EDTA-Na2•2H2O 0.74 g,加水900 mL溶解,加氢氧化钠调pH至7.0,再加水至1000 mL。)


实验结果


按照上述色谱条件(1.3)进行采集,供试品溶液色谱图如下:

供试品溶液

重现性

供试品溶液重现性


结论


本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm,3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液,理论塔板数为11853,主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的检测提供参考。




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