2023-06-12 20:45:28, 市场部 岛津(上海)实验器材有限公司
特色方案
SHIMSEN Ankylo SEC-150分析
重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度
摘要
本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm,3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液,理论塔板数为11853,主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的检测提供参考。
关键词:重组人碱性成纤维细胞生长因子 SHIMSEN Ankylo SEC-150 HPLC
实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
色谱柱:SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm,5 μm;P/N:380-01215-01);
纯水机:PR-FP-0120α-MT1(+ 60L水箱 + 取水器)
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 供试品溶液的制备
客户提供(1.0 mg/mL)。
1.3 分析条件
色谱柱:SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300 mm,5 μm;P/N:380-01215-01)
柱温:28℃
检测器及波长:PDA 280 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 µL
流动相:每1L含20 mM PB,0.5 M NaCl,2 mM EDTA-Na2的溶液(pH 7.0)
(十二水合磷酸氢二钠4.38 g,二水合磷酸二氢钠1.22 g,氯化钠29.22 g,EDTA-Na2•2H2O 0.74 g,加水900 mL溶解,加氢氧化钠调pH至7.0,再加水至1000 mL。)
实验结果
按照上述色谱条件(1.3)进行采集,供试品溶液色谱图如下:
供试品溶液
重现性
供试品溶液重现性
结论
本文建立了重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的HPLC测定方法。采用色谱柱SHIMSEN Ankylo SEC-150 (7.8×300mm,3μm)分析重组人碱性成纤维细胞生长因子原液,理论塔板数为11853,主峰与二聚体的分离度良好,此方法可为重组人碱性成纤维细胞生长因子纯度(分子排阻法)的检测提供参考。
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