科学家如何爱猫？

爱猫的方式有许多种：有人每天多点撸猫，有人学习猫咪读心术，有人领养流浪猫… 那科学家们是如何爱猫的？今天，就通过这篇今年3月发表于Cancers的文章一探究竟。

大家知道，受癌症影响的不止是人类。以乳腺癌为例，猫乳腺癌（FMC）是雌性猫的常见癌症。猫的乳腺肿瘤可以迅速扩散到邻近的腺体和淋巴结，导致疾病恶化。

猫乳腺癌与人乳腺癌在分子亚型和标志物上存在一些共性。转铁蛋白受体1（TFR-1）的过表达存在于多种人类实体瘤中。它是临床肿瘤学新型靶向疗法研究中的热门靶点。已有研究发现TFR-1可被H-铁蛋白（HFn）识别，应用装载有阿霉素的铁蛋白纳米载体（HFn(DOX)）能够有效递送药物。但在兽医学领域，鲜少有对动物癌症中TFR-1的相关研究[1]。

这篇文章的作者以猫乳腺癌为研究对象，证实了TFR-1表达上调与肿瘤转移进程相关，是肿瘤更具侵略性的指示；相比于单独使用药物，HFn(DOX)可以抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。这些发现揭示了纳米载体可能是兽医学实体瘤靶向化疗的新策略。

在这个研究中都使用到什么技术，又是哪些实验工具帮助作者拿到漂亮结果呢？

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TFR-1 蛋白在健康和肿瘤乳腺癌组织，以及猫转移乳腺癌细胞系(FMCm)的表达验证——IHC，WB，流式和免疫荧光。

图1. TFR-1猫乳腺组织的免疫组化染色结果。A.健康组织；B.猫乳腺肿瘤细胞和淋巴结。实验中使用了赛默飞世尔科技的抗人TFR-1 小鼠单克隆抗体 (clone H68.4, 货号13-6890)。

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图2. WB验证FMCm和人乳腺癌细胞系中的TFR-1表达。实验中使用了赛默飞的RIPA 裂解液, Pierce BCA定量试剂盒,  NuPAGE 4% to 12% Bis-Tris gel, iBright预染蛋白分子量标准, TFR-1小鼠单克隆抗体 (clone H68.4,货号 13-6890), SuperSignal West Pico底物和iBright 1500成像系统。

图3. FMCm的TFR-1免疫荧光染色结果。A.DAPI染色；B.TFR-1+细胞的染色；C.合并结果。实验中使用了赛默飞的抗人TFR-1 小鼠单克隆抗体 (clone H68.4 , 货号13-6890) 和羊抗小鼠IgG(H+L)Alexa Fluor 555荧光二抗。

图4. FMCm的流式分析。实验中使用了赛默飞的eBioscience™ FoxP3/Transcription factor 染色缓冲液套装 , TFR-1小鼠单克隆抗体 (clone H68.4,货号 13-6890)， 羊抗小鼠IgG (H + L) (Alexa flour®647 二抗,货号A32733) 。

02

HFn(DOX) 应用于猫乳腺癌治疗的体外实验 – 细胞增殖和凋亡检测。

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图5. 细胞增殖分析。FMCm分别使用HFn(DOX) (橙), 仅DOX (蓝), 仅HFn(绿)和RPMI(灰)在3个浓度和时间下处理。

图6. FMCm使用HFn(DOX) 或 DOX处理后48h(黑)和72h(灰)的凋亡细胞比例。实验中使用了赛默飞的eBioscience Annexin V–FITC凋亡检测试剂盒。

对于这种高复发和高转移的猫乳腺癌，研究者们以自己擅长的方式“科学爱猫”，在机制研究和疗法开发上不断探索。希望在科学手段的辅助下，猫咪们能够更健康，更长寿，也活得更开心。

参考文献

[1] Rensi, N.; Sammarco, A.; Moccia, V.; Calore, A.; et al. Evaluation of TFR-1 Expression in Feline Mammary Cancer and In Vitro Antitumor Efficacy Study of Doxorubicin-Loaded H-Ferritin Nanocages. Cancers 2021, 13, 1248.