基于正压的高通量质粒抽提解决方案

2023-01-31 10:16:04, 帝肯生命科学帝肯（上海）实验器材有限公司

质粒是携带外源基因进入细菌中扩增或者表达的重要媒介，这种基因运载工具在基因工程中具有极广泛的应用价值，为此，需要获得批量的纯化的质粒分子。目前，质粒提取纯化的方法有很多，如苯酚氯仿抽提法、磁珠法和离心柱法等。

离心柱法主要原理是将对质粒有吸附作用的官能基团固定在离心柱膜上，通过加入不同的裂解试剂、洗涤试剂并反复离心，以达到质粒与杂质分离的目的，获得纯化的质粒。此法纯度高，而且能进行微量操作，价格低廉；但是需要反复离心，不利于高通量、自动化操作，与现代生物学实验的高通量、自动化要求越来越不相符。

为了满足更高通量的需求，各大厂家也纷纷推出基于96孔板的高通量质粒小抽试剂盒。搭配离心机来进行操作，仍需要反复离心，手动加不同的试剂，来回倾倒废液，操作仍较繁琐。接下来，以QIAprep 96 Turbo和QIAprep 96 Plus质粒抽提试剂盒为例，介绍一种基于Resolvex A200正压设备的高通量质粒抽提的新方法。

Resolvex A200正压歧路板工作原理

基于正压的96孔板式质粒抽提流程

QIAprep 96 Turbo试剂盒板子叠放示例

结果展示

QIAprep 96 Turo和QIAprep 96 Plus试剂盒分别在Resolvex A200以及Biorobot（QIAGEN金标准）上进行实验，所得结果如下：

Figure: 不同方法所得质粒回收率及其CVs

Figure: 不同方法质粒纯度比较

从图中可以看出，Resolvex A200上所得结果可媲美Qiagen金标准方法-BioRobot。

此外，除了Resolvex A200半自动高通量质粒抽提方案外，TECAN还可提供全自动高通量质粒抽提解决方案（将Resolvex A200与TECAN工作站进行整合），以满足更多客户的需求。

示例：

Freedom EVO 150整合Resolvex A200

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