基因毒杂质检测方案

基因毒杂质在药物中的危害很大，但将药物中的基因毒性杂质完全除去实际操作难度很大，ICH，EMA 和FDA 均颁布了相关的基因毒性杂质控制指导文件，推荐以毒理学关注阈值( threshold of toxicological concern，TTC，1.5 μg·d-1 )来控制用药风险。

TTC 具体含义为在人的一生( 70岁) 中，每天摄入1.5 μg 基因毒性杂质，其致癌的风险是可接受的( ＜ 1 /100 000) 。

所以在实际的检测中，基因毒性杂质采用限度检查的方法。药物中基因毒性杂质的具体研究思路如下:

① 根据药物合成工艺中使用的起始物料、试剂和催化剂等，结合可能发生的化学反应推测药物中可能引入的基因毒性杂质并对其进行分类。

② 确定杂质可接受的最大限度。

③ 开发药物中基因毒性杂质的检测方法。

④ 建立专属性强、稳定性好、灵敏度高、分析速度快的分析方法，并进行方法学验证。

⑤ 对供试品进行测定，确认样品中基因毒性杂质的限度是否符合要求。

根据研究思路、待测物的性质和各种检测手段的特点，总结出基因毒性杂质的研究决策树

基因毒性杂质的化学结构种类繁多，如何针对特定的基因毒性杂质选择最合适的分析方法是药物中基因毒性杂质研究的重点和难点。

总结基因毒性杂质分析研究中各种分离方法和检测器的特点，见下图，为药物中基因毒性杂质分析方法选择提供参考。

基因毒性杂质种类繁多，且在药物中含量低、结构差异大，故针对不同的待测物选择不同的样品前处理方法。

如何提高检测方法的灵敏度和专属性，是药物中基因毒性杂质研究的重点和难点。

基因毒性杂质检测方法聚焦在如下3 个方面:

 ① 选择先进的分析仪器，如GC-MS，LC-MS 等方法: 质谱检测器的高灵敏度适用于微量或痕量物质的检测，而且专属性好。

② 采用衍生化技术: 衍生化方法增加基因毒性杂质的稳定性或者生成易检测的衍生化产物，提高分析检测的灵敏度。

③ 基质钝化: 采用萃取或SPE 等方法，除去大部分基质以减小对待测物的干扰，同时达到富集待测物的目的，提高分析方法的灵敏度。

根据相关法规和文献报道，总结药物中常见的基因毒性杂质的处理方法供参考，见下图

液相是基因毒杂质分析的基本仪器，我们一般推荐WATERS/AGILENT这2个品牌。