2022-08-01 10:59:16, 帝肯生命科学 帝肯(上海)实验器材有限公司
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一致的实验温度是确保获得可靠结果的先决条件。Tecan Spark是首款内置冷却功能的多功能酶标仪,将整体温度控制在18到42 °C之间(即便在低于环境温度的情况下),摆脱了不同时间段、不同季节环境温度波动的干扰,确保实验能够获得更一致更准确更可靠的结果。发明专利,专利号:CN106124421
不是所有的生物学反应都发生在37°C
例如斑马鱼幼虫需要25°C,昆虫细胞(Sf9)需要22°C。常见的多功能酶标仪只能加热孔板,并通常会有高于室温2~5°C的偏移。这种传统设计丢失了灵活性,并没有获取最佳实验条件,因此还会导致产生不可靠或不可用的数据。酶标仪的温度控制功能的缺乏可能已经影响或限制了你的科学研究。
温度对发光的影响
温度对使用非哺乳动物的生物酶进行生化分析起着至关重要的作用。例如,生物发光分析系统的最佳温度为20到25°C之间。这些分析测试通常对温度敏感,即使温度升高1°C,发光输出也会增加10%。因此,无法在这个临界范围内稳定控制温度的酶标仪将产生不可重现的数据。Spark是唯一一个可以减轻温度对发光分析实验影响的酶标仪,为您的有价值的研究提供更高质量的数据。
快速冷却
支持多用户的酶标仪就需要多种的实验条件。酶标仪实现温控的一个主要瓶颈,就是需要等待仪器到达所需的温度。加热检测室很容易,但是如果是需要冷却呢?
一般情况下,一个被动降温的酶标仪通常需要60分钟才能使37°C冷却到室温,这个时间会耗费您宝贵的时间还会打乱您繁忙的日程安排,尤其是在一个多用户多需求的实验室里。
Te-Cool 模块的主动冷却功能有效降低等待时间,为您的实验提供快速稳定的温度环境。
亲眼目睹温度对酶标仪检测信号的
影响及Spark的表现
检测参数
微孔板类型 | Greiner Bio-One 白色96 孔板[GRE96fw_chimney] |
温度 | 18,22 (室温) 26 or 30 °C |
智能微孔测量模式 | |
检测模式 | 化学发光 – 智能微孔 |
标签 1 – 萤光素酶 1 (萤火虫萤光素酶) | |
注射模式 | 注射孔B;100 µl 底物 2;200 微升/秒; 注射后再注满 |
等待时间 | 3秒 |
检测模式 | 化学发光 |
衰减模式 | 自动 |
测量时间 | 10,000 毫秒 |
停留时间 | 0 毫秒 |
输出格式 | 计数/秒 |
标签 2 – 萤光素酶 1 (海肾萤光素酶) | |
注射模式 | 注射孔B;100 µl 底物 2;200 微升/秒; 注射后再注满 |
等待时间 | 3 秒 |
检测模式 | 化学发光 |
衰减模式 | 自动 |
测量时间 | 10,000 毫秒 |
停留时间 | 0 毫秒 |
输出格式 | 计数/秒 |
结果
1
在酶学实验中,
生物发光信号强度随温度发生改变
酶促反应中的转化率通常取决于温度的改变,温度升高反应速率会增加。在一个典型的发光激酶试验中,我们在检测不同温度下萤光素酶活性的变化中,发现了这一现象(图1)。温度每升高1°C,发光信号增强约10%。
图1:萤光素酶的发光信号强度取决于温度的变化。
温度升高会产生更高的发光信号。
2
在动力学实验中,
生物发光信号强度随温度发生改变
在动力学测定中,当酶标仪平衡至室温时,室温下的微孔板中的发光信号是恒定的(图2A)。与初始值相比,当酶标仪内的温度升高,微孔板会被加热,从而产生更高的发光信号。在仅6分钟的检测时间内(该时间内可完成384孔板的检测),在高于室温4°C时发光信号增加了34%;在高于室温8°C时增加了78%;酶标仪在室温条件下操作,信号强度降低了2%。此外,在较高的温度下检测,结果的变异系数(CV值)显著增加(图2B)。
图 2:动力学检测中随时间变化的生物发光信号。
在6分钟的测量时间内,由于孔内液体被加热,
生物发光信号增加(A)。
信号变化增大,测量结果的CV增大(B)
3
酶学稳定性取决于温度的变化
实验温度的变化并非像我们预想的那样会影响酶的活性。一些酶在不同温度下的转化率可能会改变,而另一些酶的稳定性则会降低。针对萤火虫和海肾萤光素酶进行连续检测生物发光实验,将酶标仪置于不同的实验温度下,这一实验结果证实了该推论。该实验方法需要相对较长的检测时间,导致每个孔的检测时间约为30秒,整个96孔板大约需要45分钟。图3显示萤火虫萤光素酶的生物发光信号随着时间的推移而减少,这是由于蛋白质在高温下,尤其是在30°C下具有不稳定性(A)。相比之下,海肾萤光素酶没有受Spark酶标仪内温度的影响(B)。比较多个微孔板孔的CV值,温度对酶活性的影响变得很明显(图4)。
图3:萤火虫和海肾萤光素酶生物发光实验。
随着温度的升高,海肾萤光素酶信号稳定(B),
但温度升高会降低萤火虫萤光素酶的活性(A)。
图4:萤火虫萤光素酶活性随温度升高而降低,
在30°C时CV值较高。
作为一家在全球范围内提供生物制药、法医学和临床诊断实验室仪器和解决方案的供应商,Tecan(www.tecan.com)专门从事生命科学领域实验室自动化工作流程解决方案的开发、生产和分销。我们的客户包括制药和生物技术公司、大学研究部门、法医和诊断实验室。帝肯也是原始设备制造商(OEM),是开发和制造OEM仪器和部件的一员,然后由合作公司分销。
公司于1980年在瑞士成立,全球约3300多名员工,在欧洲、美国和亚洲均设有研发基地和生产中心,全球化的销售和服务网络遍布52个国家和地区。2020年,帝肯销售额为7.309亿瑞士法郎(约7.81亿美元)。帝肯集团的注册股份在瑞士六大交易所(TECN;ISIN CH0012100191)交易。
在帝肯,我们致力于推动全球医疗健康规模化创新。为此,我们与医疗保健和生命科学领域的客户紧密合作,除了提供尖端技术与高质量产品,旨在帮助用户深入了解对抗疾病,完善疾病发现机制,革新治疗方法,推动医疗创新成果从生命科学研究到临床的拓展,为全球的患者提供高效可行的临床诊断和治疗方案。
帝肯热线:4008 213 888
帝肯官网:www.tecan.com
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