2022-07-20 16:29:28
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在任何领域,通常都存在着“误解”,这些误解或一直延续到下一代,这些误解通常是由于从业人员对实际问题缺乏了解而引起的。本期为您揭开高效液相(HPLC)色谱柱10个最流行的误解的神秘面纱。
由于篇幅过长,本文分为上下两篇,点击查看:【知识分享】高效液相(HPLC)色谱柱10大误解(上)
误解6
使用填充较小颗粒的色谱柱,总能获得更高的效率
进样量包括回路尺寸以及进样阀内的其他体积。
从进样器出口到色谱柱入口的油管容积。
保护柱间隙的体积,包括端接头(如果有)。
在线过滤器体积(如果有)。
入口色谱柱接头内的内部容积包括多孔筛板和流动通道。
色谱柱的体积。
底部色谱柱接头内的内部容积包括多孔筛板和流动通道。
从色谱柱出口到检测器入口的油管容积。
流通池之前的检测器内的管道容积。
所有这些体积的方差都是累加的。因此,可以最大程度地减少进样量并使色谱柱入口管的长度短,内径小,但如果从色谱柱出口到检测器的连接管有1 m,则谱带展宽可能足够大影响分离的整体效率。因此,如果您希望获得1.8 μm HPLC色谱柱或内径为1.0 mm的色谱柱的预期效率,请确保将柱外效应降至最低。
误解7
对于硅胶填料,残留的硅烷醇导致拖尾峰
误解8
硅胶填料只能在pH2-7范围内使用
纳谱分析
ChromCore系列液相色谱柱参数信息表
误解9
现代HPLC色谱柱应承受至少1000次进样
误解10
色谱柱应始终盖紧,以防止填料与大气接触
而损坏
假!通常,端接件上的小孔的直径可能不大于0.02英寸,其横截面面积很小,以至于空气进入填料和溶剂内部的溶剂接触会损坏色谱柱。色谱柱蒸发极少。即使有少量空气进入色谱柱,也可能很难扩散通过微粒填充床并与足够的填充材料接触,从而产生不利影响。如果色谱柱中有少量空气,则在下次将其安装到HPLC仪器中并对其进行泵送流动相后立即对其加压,则少量的空气可能会在高压下溶解或被冲洗掉。初始液体在短时间内不会对以后的使用造成任何问题。但是,如果一定要通过封住端接装置而感到更加安全,那就这样做。大多数色谱柱配备了色谱柱接头,可以拧紧这些螺帽,以防止存储溶剂蒸发或空气进入填充床的任何可能性。
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