“广厦千万间，细胞聚欢颜”——细胞工厂应用盘点

细胞工厂（CellFactory）培养技术在国外已有四十多年的应用历史，而近十来年才在中国开始逐渐普及。

细胞工厂是一种设计精巧的细胞培养装置，在有限的空间内利用了最大限度的培养表面。Nunc细胞工厂材质为符合《美国药典》规定的聚苯乙烯，培养表面经特殊处理，大大提高了细胞的吸附性。超声焊接的工艺避免了胶粘合带来的溶析出申报质疑。

Nunc细胞工厂单层培养面积是632平方厘米,一个10层细胞工厂相当于80.5个10厘米培养皿或者36.1个175培养瓶。大大节省了操作步骤，减少培养空间以及培养时间，同时极大降低多次开盖引入的染菌风险。更重要的是，线性放大保持绝佳的一致性，无需花费精力摸索工艺放大过程，极大缩短PD周期。

鉴于细胞工厂的优良特性，这位搬砖人目前在哪些生物制药领域孜孜板砖呢？

Nunc细胞工厂是目前应用较多的细胞工厂系统，已广泛应用于疫苗工业的规模生产。如牛肾细胞制备轮状病毒疫苗1；2BS细胞制备水痘减毒活疫苗2；原代鸡胚细胞制备腮腺炎疫苗3；沙鼠肾原代细胞制备肾综合症出血热灭活疫苗4等。

通过与NUNC的细胞工厂自动化操作设备结合使用，可全面实现细胞培养的自动化，从而大大地减低劳动强度和密集度。

人用病毒疫苗生产常用的细胞多为贴壁细胞，比如Vero细胞、人二倍体细胞、原代鸡胚细胞等。病毒载体类新冠疫苗以及多数流感疫苗的生产都会使用到细胞工厂。线性放大的一致性，有助于缩短争分夺秒的工艺开发，加快疫苗研发的进程，快速应对突发的恶性疫情事件。

细胞治疗在工艺上涉及到慢病毒载体的获取，临床级别的慢病毒大多是通过在细胞工厂瞬时转染293或293T细胞生产的。大规模慢病毒生产都是小规模生产通过增加培养单元来直接放大。因为易于操作，10层装置(CF-10 cata. num 170009 )是首选5-6。

目前FDA已批准多个脐带血来源的HPC(hematopoieticprogenitorcell)造血干细胞上市7。干细胞在国内的研究依然是雨后春笋似蓬勃发展。比如西比曼生物科技就致力于用于治疗关节和自身免疫疾病的人脂肪组织来源间充质祖细胞（haMPC）的研究8；苏州吉美瑞生有多个自体肺干细胞疗法在研9。Nunc细胞工厂在培养间充质干细胞，多功能干细胞有着丰富的工艺放大和验证数据10-11。

基因治疗用于基因递送的病毒载体系统包括腺病毒、腺相关病毒以及慢病毒。以贴壁细胞VERO,MDCK,HEK293等收获高纯度，高滴度病毒颗粒，同样离不开细胞工厂12。

溶瘤病毒通过裂解肿瘤细胞，释放肿瘤相关抗原，从而激活免疫应答。临床应用最广泛的溶瘤病毒包括腺病毒、单纯疱疹病毒和痘苗病毒等。常用的瞬时转染载体贴壁细胞系包括VERO,HEK293, BSC-113等细胞系。

出色的线性放大模式，封闭式的培养体系，完善的临床申报资质，再加上丰富的用户使用案例，使得越来越多的研究者倾向于选择Nunc细胞工厂作为工艺放大的首选。

参考文献：

1.刘学平，魏至栋，细胞工厂生产口服轮状病毒活疫苗的应用研究微生物学免疫学进展2011年第39卷第4期

2.王斐，单雪峰，水痘减毒活疫苗生产工艺研究ChineseJournal of New drugs 2012，21（10）

3.张芹，周锋，腮腺炎病毒在转瓶和细胞工厂中制备的比较，国际生物制品学杂志2019,42(4)

4.姚伟,钟建琴,苏波,等.细胞工厂培养沙鼠肾原代细胞制备肾综合症出血热灭活疫苗[J ] . 中国生物制品学杂志,2010,23(6):613～614

5.Otto-Wilhelm Merten, Matthias Hebben and Chiara Bovolenta.Productionof lentiviral vectors Molecular Therapy — Methods & ClinicalDevelopment (2016) 3, 16017;

6.Optimization of retroviral vector production using serum freecondition. HG Eckert

7.https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/cellular-gene-therapy-products/approved-cellular-and-gene-therapy-products

8.https://www.cellbiomedgroup.com/about-us/company-overview?lang=cn

9.http://www.regend.cn/kejiyanfa_cpgx.htm

10.Culture of human mesenchymal stem cells in Nunc Cell Factory systems

11.Development of Feeder-Free PSC Culture System Enabling Translational& Clinical Research

12.Large scale transfection of mammalian cells for the production ofrecombinant adenovirus. Shyam Subramanian, Merck&co, presentationWilbio NOVEMBER 2000 Gene Therapy

13.重组溶瘤痘病毒rVV-CCL5-SSTR2-Luc+的构建及其杀瘤活性李丹洋，基础医学与临床 April2020 Vol.40 No.4