2022-06-16 15:17:43
点击蓝字
关注我们
背景
中药紫草的33种农残分析
紫草为紫草科植物新疆紫草、内蒙紫草的干燥根,含有大量羟基萘醌色素成分。这些成分对GC/MS/MS色谱柱污染较为严重,易造成目标物线性不好、回收率低和重现性差,常规的固相萃取法都不能很好的净化。
纳谱分析根据植物色素成分特点,优化了固相萃取三对于色素的吸附能力。相比常规固相萃取三,优化后的固相萃取三的SPE柱可以吸附更多色素类成分,从而降低了样品中色素对色谱柱的污染和基质效应。
今天,我们来看看紫草项目的前处理效果吧。
适用范围
本方法参考中国药典2020版2341第五法中的固相萃取法方式二和三,适用于现有气质质分析固相三无法很好净化的基质干扰大和色素较多的中药材农残检测。
实验步骤
一
对照品溶液的制备
1.1 混合对照品配制
精密量取禁用农药混合1mL,置20mL量瓶中,加乙腈稀释至刻度,摇匀,备用;
1 .2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备
取磷酸三苯酯对照品适量,精密称定,加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液,即得。精密量取适量,加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。
1.3 空白基质溶液的制备
取空白基质样品,同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。
1.4 基质混合对照溶液的制备
分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份),置氮吹仪上,40°C 水浴浓缩至约0.6mL,分别加入混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL,加乙腈稀释至1mL,涡旋混匀,即得。
二
供试品溶液的制备
2.1 提取
精密称取5g样品(3号筛),加氯化钠1g,加入50mL乙腈,匀浆处理2分钟,离心后分取上清液,残渣再加50mL乙腈,匀浆处理1分钟,离心后,合并两次提取上清液,减压浓缩至3~5mL,加乙腈定容至10mL,摇匀,待净化。
三
净化
GCMSMS样品:
SPE柱:
SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱 500mg/500mg/6mL
净化:
取SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱用乙腈:甲苯(3:1)10mL活化,量取上述紫草提取液2mL,置已活化的SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱中,用乙腈:甲苯(3:1)15mL洗脱,收集全部样品液与洗脱液,减压回收至2mL,即得。
GC/MS/MS测定:
精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL,氮吹至0.4mL加入混合对照溶液,乙腈定容至1mL,再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液,混匀,过0.22μm尼龙针式过滤器,上机分析。
LCMSMS样品:
SPE柱:
SelectCore HLB固相萃取柱200mg/6mL
净化:
量取上述紫草提取液3mL,过SelectCore HLB固相萃取柱,收集全部净化液,混匀,即得。
LC/MS/MS测定:
精密量取过固相萃取柱后溶液1mL氮吹至0.4mL加入混合对照品液,乙腈定容至1mL,再加入0.3 mL水,混匀,过0.22μm尼龙针式过滤器,上机分析。
四
处理后溶液的颜色比对
左至右分别是紫草提取液、紫草提取液过SelectCore HLB固相萃取柱、紫草提取液过SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱
五
气相色谱-串联质谱法
(岛津 GC-MS -TQ8040 NX)
色谱条件
色谱柱:SHIMADZU SH-Rxi-17Sil MS,30m×0.25mm, 0.25μm;
进样口温度:250℃;
升温程序:初始温度为60℃,保持1min;以10℃/min升温至160℃;再以2℃/min升温至230℃,最后以15℃/min升温至300℃,保持6min;
载气:高纯氦气(纯度>99.999%);
进样方式:不分流进样;
恒压模式:146kPa;
进样量:1μL。
质谱条件
电离方式:电子轰击电离源(EI);
电离能量:70Ev;
接口温度:250℃;
离子源温度:250℃;
监测方式:多反应检测模式(MRM);
溶剂延迟:10.0min。
GCMSMS监测目标物注意事项:
久效磷参考LC/MS/MS测定结果。
六
高效液相色谱-串联质谱法
(岛津 LC-MS 8045)
色谱条件
色谱柱:ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm,2.6μm)
流动相:
A:0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵)
B:乙腈-0.1%甲酸水溶液(含有5mmol/L甲酸铵)=95:5
梯度:
时间 (min) | 流速 (mL/min) | 流动相A (%) | 流动相B (%) |
0 | 0.3 | 70 | 30 |
1 | 0.3 | 70 | 30 |
12 | 0.3 | 0 | 100 |
14 | 0.3 | 0 | 100 |
14.1 | 0.3 | 70 | 30 |
16 | 0.3 | 70 | 30 |
流速: 0.3mL/min
柱温: 40℃
进样量: 2µL
质谱条件
离子源: 电喷雾离子源(Electrospray ionization,ESI)正离子扫描
监测方式:多反应监测(Multiple Reaction Monitoring,MRM)
离子源接口电压:4.5kV
雾化气:氮气3.0L/min
加热气:干燥空气10.0L/min
DL温度:250℃
加热模块温度:400℃
接口温度:300℃
干燥气:N2 10L/min
七
化合物出峰情况
紫草基质加标GC/MS/MS部分化合物出峰情况
久效磷
甲基硫环磷
八
添加回收率
表1 紫草中33种农药残留的测定添加回收结果(%)
九
实验讨论
通过以上实验对比数据可以看出,SelectCore GCB/NH2-A柱针对紫草中羟基萘醌色素类成分去除效果良好,净化后的紫草样品溶液颜色较浅,减少了污染GC/MS/MS柱前端的风险。另外搭配SelectCore HLB固相萃取柱用于LC/MS/MS分析,可为紫草的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供良好的帮助。
中药农残相关实验耗材:
方法类别 | 推荐产品 | 货号 | 适用品种 |
快速样品 处理法 (QuEC-hERS) | SelectCore QuEChERS 萃取盐包 6g MgSO4, 1.5g NaOAc; 50/pkg | QS-002 | 川桐皮、川赤芍、木通、通草、灯心草、白芍、麦冬、泽泻、益智、姜黄、枸杞、大枣等含碳水化合物和少量色素类 |
SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, 900mg MgSO4, 300mg PSA, 300mg C18, 300mg Silica, 90mg GCB; 50/pkg | Q-15PCSG01 | ||
注意事项: 前处理步骤较多,提取效率较为充分,溶液颜色较深,基质标每次只能一个点 加入盐包时会放热,注意冰浴降温 对杀虫脒有吸附,回收率可能偏低 | |||
SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, Pesticide Residue A06(含色素挥发油中药农残Q法); 50/pkg | Q-15A06 | 木香、厚朴、羌活等含挥发油和色素类 | |
注意事项: 改良后的配方可以吸附更多的色素和挥发油基质 | |||
SelectCore QuEChERS 净化管15mL, Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法); 50/pkg | Q-15A07 | 丹参专用 | |
注意事项: 改良后的配方提高了丹参农残测定的稳定性和重现性 | |||
固相萃取方法 一 | SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, 1200mg MgSO4, 300mg PSA, 100mg C18; 50/pkg | Q-15PC04 | 基质简单,色素较少如:人参、西洋参、茯苓、白芍、山药、隔山撬、浙贝母、麦冬、葛根、粉葛、川赤芍、赤芍、白附片、川木通、桑白皮、三七、黄芪、甘草、天花粉 |
注意事项: 适用于含有较多有机酸和糖干扰的样品,对磺隆类和杀虫脒化合物吸附较强 | |||
固相萃取方法 二 | SelectCore HLB固相萃取柱 200mg/6mL; 30/pkg | HLB060-060200-1 | 紫草、北柴胡、陈皮、山楂、大黄、柴胡、当归、党参、地黄、防风、黄芪、桔梗、苦参、益母草、黄精、灵芝、茯苓、大青叶、板蓝根、甘草等含少量色素类 |
注意事项: 吸附色素能力相比固相1要好,对滴滴滴类化合物吸附力较强故GCMSMS样品分析不适用,多用于LCMSMS样品净化 | |||
SelectCore HLB-A中药农残专用柱 200mg/6mL; 30/pkg | HLBA60-060200-1 | 千年健、桃仁、苦杏仁、花椒、没药、紫苏叶、金银花、艾叶、款冬花、乌梅、桑叶、牛蒡子、菟丝子、酸枣仁、莪术、槟榔、小茴香、枳实、郁金、白头翁、菊花、陈皮、白花蛇舌草、褚实子、化橘红、川防风、当归等富含挥发油和色素类气质质测定项目 | |
注意事项: 对磺隆类化合物吸附力强,且对三氯杀螨醇类、滴滴滴类化合物具有一定吸附作用,故LCMSMS样品分析不适用,GCMSMS样品分析需5mL样品上柱净化 | |||
SelectCore HLB-B中药农残专用柱 200mg/6mL; 30/pkg | HLBB60-060200-1 | 色素较多,挥发油较多如:火麻仁、菟丝子、酸枣仁、羌活、川芎、莪术、蛇床子、紫苏叶、姜黄、干姜、陈皮、枳实、青皮、防风、莱菔子、槟榔、当归、小茴香、豆蔻、黄连、黄柏、虎杖、大黄、马钱子、化橘红、当归 | |
注意事项: 对滴滴滴类化合物具有一定吸附性,适用于LCMSMS样品分析,3mL样品上柱净化 | |||
SelectCore HLB-C中药农残专用柱 500mg/6mL; 30/pkg | HLBC60-060500-1 | 补骨脂、吴茱萸、木香、厚朴、沉香、没药、蛇床子、火麻仁、羌活、小茴香、马钱子等富含挥发油、色素和生物碱类气质质测定项目 | |
适用于重油重色素和生物碱的果实和种子类中药,GCMSMS样品分析需2mL样品上柱净化 | |||
固相萃取方法三 | SelectCore GCB/NH2-II 固相萃取柱 500mg/500mg/6mL; 30/pkg | GN100-061000-2 | 色素含量多,含少量挥发油如:金银花、菊花、款冬花、忍冬花、益母草、淫羊藿、龙胆草、大黄、虎杖、何首乌、麻黄、苦丁茶、刘寄奴、山银花、忍冬藤、川牛膝、地黄、桑叶 |
注意事项: 洗脱液中有甲苯,毒性较大,且洗脱时间较长; 对磺隆类农药有一定吸附LCMSMS样品分析时应联合其他净化方式分析磺隆类数据 | |||
SelectCore GCB/NH2-A 固相萃取柱 500mg/500mg/6mL; 30/pkg | GNA100-061000-1 | 紫草、黄连、黄柏、何首乌、干益母草、吴茱萸、虎杖、大黄、决明子、胡黄连、苕叶细辛、菊花、千里光、蒲公英、艾叶、荆芥、茵陈、金银花、番泻叶、龙胆草、蛇床子、川乌、草乌、车前子、地耳草、金钱草、薄荷、广藿香、老鹳草、紫苏叶、忍冬藤、栀子、连翘、莲子心、竹叶柴胡、矮地茶、红景天、麻黄、白鲜皮、赶黄草、款冬花等 | |
注意事项: 适用于干扰较为严重的GCMSMS样品分析。如若用于LCMSMS样品分析,应联合其他净化方式 | |||
液相色谱柱 | ChromCore C18-MS Pesticides 2.6μm, 2.1×100mm | S013-026018-02110S | |
气相色谱柱 | NanoChrom BP-50+MS, 30m×0.25mm×0.25um | G5025-3002 |
试用方法:
扫描右侧二维码进行试用申请。
点击左下角“阅读原文”进行试用申请。
您可咨询当地销售或拨打热线电话:4008083822,或可在微信公众号(微信公众号名称:纳谱分析)首页,直接在线申请试用。
系列阅读
关注我们,更多干货分享
我们坚持以质量、创新和服务为广大色谱工作者提供优质的色谱分离产品和技术支持。
产品应用涉及小分子药物及多糖分析、生物分离、DNA/RNA核酸分离、手性拆分和样品前处理等。
纳谱分析技术(苏州)有限公司
04-12
技术分享 | 一文了解物理吸附与化学吸附的含义与异同04-12 安东帕康塔
展会预告|与您相约 CIBF@重庆04-12
行业应用 | 如何利用滤光箔片拓展的密度计测量光固化样品04-12 Anton Paar China
邀请函 | 安东帕MCR流变仪用户培训会_北京04-12
GC色谱柱垫圈选择指南04-11 珀金埃尔默
科研赋能:SP-ICP-MS与SC-ICP-MS技术的焕新升级之旅04-11 珀金埃尔默
国产光谱仪器与应用技术研讨会在海光公司成功召开04-11
海光邀您参加第十七届中国科学仪器发展年会(ACCSI 2024)04-11
让数据可控可计量 | 广电计量正式立项《数据资源控制及资产辨认的计量要求》团体标准04-11
质谱成像前沿探秘:专访再帕尔·阿不力孜教授与贺玖明研究员04-11 飞飞
邀您相聚金陵,聚焦合成生物学前沿分析技术04-11
环丙基的妙用大盘点:别只知道是麻醉剂!04-11
【邀请函】默克与您相约济南CPQC04-11
精美礼品等你来领!默克色谱柱使用者福利来啦04-11
爱色丽彩通x琅世 | 共启饰面行业色彩标准化新篇章04-11 爱色丽彩通
以旧换新 | eXact 2系列便携式色差仪产品升级优惠!04-11 爱色丽彩通
展会预告 | 爱色丽彩通诚邀您莅临2024 CHINAPLAS04-11 爱色丽彩通
直播报名 | eXact2新测量技术及应用场景全览04-11 爱色丽彩通
华西口腔岛津合作实验室:先进技术全面支持 口腔医学卓越发展04-11 分析测试百科网