药典应用︱参照2020版中国药典测定右旋糖苷70的分子量及其分布

2022-05-13 22:14:45 东曹（上海）生物科技有限公司

右旋糖苷70又叫中分子右旋糖苷，系蔗糖经肠膜状明串珠菌L.-M-1226号菌(Leuconostoc mesenteroides) 发酵后生成的高分子葡萄糖聚合物，经处理精制而得。右旋糖苷70可抑制血小板的粘附作用，而具有抗栓作用。可用于弥漫性血管内凝血、微循环血栓、栓塞性血小板减少性紫癜。

分子量及其分布是表征右旋糖苷的重要参数，中国药典规定，右旋糖酐70的重均分子量 (Mw) 应为64000～76000，且规定了高效尺寸排阻色谱法为测定方法。本应用是参照2020版《中国药典》，采用SEC色谱柱TSKgel G4000PWXL对右旋糖苷70的分子量及其分布进行测试。

1. 分析条件

仪器：HLC-8220凝胶色谱仪

色谱柱：TSKgel G4000PWXL（7.8 mmI.D. ×30 cm, 10 μm）

流动相：0.71%Na2SO4

流速：0.5 mL/min

样品浓度：10 mg/mL

进样体积：20 μL

柱温：35℃

检测器：RI

2. 分析结果

图1 右旋糖苷70溶液色谱图

图2 葡萄糖溶液色谱图

图3 葡萄糖2000溶液色谱图

图1显示，右旋糖苷70出峰时间范围 (起点12.9 min～终点19.02 min) 在葡聚糖2000保留时间 (t0 =10.367 min, 见图3) 与葡萄糖保留时间 (tT =20.697 min, 见图2) 之间，色谱柱理论塔板数TP按葡萄糖峰计算，结果为13756 (TP＞5000) ，以上结果满足药典规定系统适用性要求。

图4 右旋糖苷校正曲线

表1 右旋糖苷70分子量计算结果

采用右旋糖苷标准品作右旋糖苷校正曲线（图4），对图1右旋糖酐70样品进行分子量计算，样品分子量计算结果为：Mw 70718，符合药典规定分子量范围（Mw 64000~76000），10%大分子部分分子量 Mw 结果为：153496，10%小分子部分分子量Mw结果为：25440，符合药典规定要求（10%大分子部分重均分子量不得大于185000，10%小分子部分重均分子量不得小于15000）。

3. 结论

以上结果表明：TSKgel G4000PWXL色谱柱可以满足2020年版中国药典对右旋糖酐70样品分子量与分子量分布的测试要求。