【实验直击】磁微粒化学发光法检测BeaverBeads®在促甲状腺素检测试剂盒中的应用

2021-12-04 14:48:52, Dr. BEAVER

TSH检测的临床意义：促甲状腺激素（thyrotropin, thyroid stimulating hormone, TSH）是垂体前叶分泌的糖蛋白激素，能促进甲状腺素的合成和分泌，而TSH又受下丘脑所产生的“促甲状腺激素释放激素（TRH）”的调节。当血液中甲状腺激素（T3、T4）过高时，通过负反馈调节，可抑制垂体TSH的分泌释放。因此在原发性甲减时，由于T3、T4减少，负反馈调节TSH反应性增高。垂体TSH测定不仅是目前诊断甲状腺功能减低的最敏感指标，而且有助于甲状腺性和下丘脑-垂体性甲状腺功能减低的鉴别，亦可作为甲状腺激素替代治疗调整剂量的检测手段。

TSH含211个氨基酸，糖类约占整个分子的15％。整个分子由两条肽链——α链和β链组成，分子量为28000D。目前TSH主要的测定方法有放射免疫测定法和化学发光免疫分析法。放射免疫测定法成本较低、操作也较化学发光免疫分析法简单，但是，试剂有放射性危害和环境污染等缺点。化学发光免疫法检测具有操作简单，灵敏度高等优点，并且随着生物技术的发展，化学发光免疫分析试剂和仪器价格昂贵这一缺点也在改善。

[实验直击]促甲状腺素检测试剂盒

（磁微粒化学发光法）

检测原理：利用酶标记生物活性物质进行检查，免疫反应复合物上的发光底物和酶作用在信号试剂下发光，在发光信号检测器的引导下进行发光检测。

实验目的

检测海狸免疫磁珠在促甲状腺检测试剂盒中的应用

材料方法

仪器：全自动化学发光免疫分析仪 SMART 500S

试剂：促甲状腺素检测试剂盒（磁微粒发光法）、清洗液和A、B液、保养维护液、光检液、校准品S0、磁珠稀释液

耗材：反应杯

实验设计

1）重复性验证：用高低两种不同的临床样本重复检测，控制变异系数，提高试剂的重复性。

2）梯度浓度验证：梯度稀释样本，测试不同浓度发光值，同时分析磁珠的发光值、梯度、本底发光值等指标，检验磁珠应用效果。

1 梯度浓度验证结果

表1 梯度浓度测试结果（注：A：试剂盒中进口磁珠；B：BeaverBeads）

TSH	A	B	B/A
S0	485.30	235.30	48.49%
S1	21833.70	25780.30	118.08%
S2	45550.30	50263.70	110.35%
S3	224334.30	248021.00	110.56%
S4	453856.00	516108.30	113.72%
S5	4155559.30	4637542.30	111.60%

在TSH检测试剂盒中, BeaverBeads^®的化学发光信号与试剂盒中磁珠基本保持一致，信号值稍偏高，整体偏差控制在15%以内。

2 磁珠重复稳定性性验证

表2. 重复性检测结果（注：A：试剂盒中进口磁珠；B：BeaverBeads）

	A		B
TSH	低值	高值	低值	高值
1	21235	389438	23986	445613
2	19909	395289	21599	416672
3	20344	382770	23315	431681
4	20663	372674	24160	445812
5	20116	380480	23412	459975
6	20889	388004	23317	436594
7	21435	380919	23260	441463
8	20378	367668	22582	437604
9	20425	384537	24089	445911
10	22244	389795	24272	467071
CV	3.40%	2.16%	3.52%	3.18%