惊！细胞划痕实验还能如此简单，我out了

然而在现实实验中，我们常常遇到以下的划痕图像和不准确的分析结果：

图  2  . 划痕实验原始图片（左侧）及分析结果（右侧），

黄色为识别显示的轮廓

Molecular Devices 公司新推出的 AI 细胞图像分析软件 IN Carta ，可以帮助实验人员为理想和现实划等号，节省设置方法的时间，提高分析效率及准确性。

1 . 部分区域细胞稀疏，且有光圈及其他杂质干扰

2 . 背景存在较多个小圆环干扰

与大多数实验识别细胞个体不同，进行划痕的宽度或者面积测量时，需要识别的是非细胞区域。而由于细胞贴壁生长不均匀等现实原因，会遇到以下问题：

为了解决以上问题，通常需要繁琐的图像处理步骤，如增强图片对比度，设置图像平滑效果、调整阈值、过滤掉较小面积区域等。

在高内涵分析中，微孔板中图像质量各异，想要进行批量的划痕实验分析，对分析方法的要求也更高。高内涵分析方法要对大量的图像具有普适性，因此还需要更多的滤镜组合来保证划痕区域的准确识别，方法设置消耗的时间久，对实验效率造成较大的影响。

IN Carta 对于划痕的区分，只需三个主要步骤：

Step 1   圈选要识别的目标 target

Step 2   圈选背景 background

Step 3    根据识别结果，进行重复训练

除制造水平或垂直方向划痕以外， 还可以采用其他方法建立圆形“划痕”，且不对细胞造成损伤。例如 Platypus 公司的 Oris 细胞迁移试剂盒，在接种细胞前，先在微孔板内中央放入障碍物，障碍物占据圆形区域；然后接种细胞，细胞贴壁过程中自动避开了障碍物区域；之后将障碍物移除（或自动溶解），则形成了初始的无细胞生长区域，后期监测圆形区域面积的变化程度即可。

Transwell 小室（Transwell chamber, Transwell insert）也可用来检测细胞迁移能力，其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，将  Transwell  小室放入培养板中，小室称上室，培养板称下室，上室内为上层培养液，下室内为下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

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