解决方案 | 动物源性食品中的硝基咪唑残留量检测

1、样品提取

精密称取市售羊肉制品20g，加入10g硅藻土，混匀，再加入5mL饱和氯化钠水溶液和70mL甲醇-丙酮（3+1），均质3 min，后续在10000r/min条件下离心2min，收集上清液，样品残渣用50mL甲醇-丙酮（3+1）重复提取两次，合并提取液。

将提取液置于MVP全自动高通量真空平行浓缩仪上按温度38℃、转速150rpm、真空度120mbar浓缩至仅剩水相，加入50mL饱和氯化钠水溶液和25mL乙酸乙酯，振摇3min，分层后收集乙酸乙酯相，水相再用20mL乙酸乙酯重复提取两次，合并乙酸乙酯提取液，经无水硫酸钠除水，于MVP全自动高通量真空平行浓缩仪上按温度36℃、转速150rpm、真空度250mbar浓缩近干，用乙酸乙酯-环己烷（1+1）定容至5mL，待净化。

2、凝胶净化

凝胶净化柱采用Bio-Beads SX3，20×300 mm；流动相采用乙酸乙酯-环己烷（1+1）；使用GPC 1000全自动凝胶净化系统按照图1方法对过程1中提取液进行净化，收集净化液，于MVP全自动高通量真空平行浓缩仪按按温度36℃、转速150rpm、真空度250mbar浓缩近干，用甲醇定容至5mL，待后续处理。

图1 GPC1000凝胶净化方法流程

3、固相萃取

将过程2中的净化液加入SPE 1000全自动固相萃取系统按照图2方法进行固相萃取富集，洗脱液加入MVP全自动高通量真空平行浓缩仪按温度38℃、转速150rpm、真空度120mbar浓缩近干，用甲醇定容至1mL，经0.22μm滤膜过滤后，待上机检测。

图2 SPE1000固相萃取方法流程

4、加标回收率测定

按照前述的方法准备样品，在样品中分别按1ng/g、4ng/g的标品浓度加入一定体积的10种硝基咪唑标准使用液，最后得到加标样品待上机检测。

5、标曲配制

制备6份阴性样品溶液，按照最终定容浓度0、10、20、50、100、500ng/mL分别加入10种硝基咪唑标准使用液，上机检测。