2021-07-23 14:32:58 昭和电工科学仪器(上海)有限公司
外泌体的SEC/MALS分析
Exosome,中文名外泌体,因其形态而得名,直径为30-150nm,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。
研究发现外泌体在很多生理病理上起着重要的作用,如免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不同的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构,能很好的保护其包被的物质,且能靶向特定细胞或组织,因此是一种很好靶向给药系统(targeted delivery system)。
以下是细胞培养上清液经过EV纯化后的外泌体,通过聚合物基质水溶性SEC色谱柱SB-806 HQ,配合不同检测器的分析结果。
EV 纯化条件条件
(1)浓缩步骤:市售离心超滤膜100kDa(40倍浓缩)
(2)亲和步骤:市售亲和纯化试剂盒(相当于10倍浓度)
Sample :1. Cell culture supernatant 50 μL inj.2. Concentrate 50 μL inj.3. Crude product 15 μL inj.
UV 280 nm对于培养皿培养出的所有不纯物质、荧光Ex 280 nm / Em 348 nm对于蛋白质,光散射检测器(LS)对于纳米颗粒具有高灵敏性。由EV纯化的主成分,在8分钟左右和杂质分离。虽然紫外和荧光检测器可以观测纯化过程的进展和成果,但灵敏度低,特别是纯化初期,LS是更有效的追踪手段。
SB-806 HQ色谱柱拥有可以保留、分离各种纳米颗粒的合适孔径,结合各种检测器,是生物靶向药生产过程中非常合适的水溶性色谱柱。
SB-800 HQ系列色谱柱规格
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