关注食品安全 | 婴幼儿奶粉中香兰素的含量测定

2020-12-12 09:37:37 艾杰尔-飞诺美（Agela & Phenomenex）

近日

某品牌婴儿奶粉抽检不合格被市场监督管理局紧急召回，事件再次引发了人们对婴幼儿乳制品安全质量问题的关注。被曝出的不合格项目的罪魁祸首是一种叫“香兰素”的成分。

那么，香兰素究竟是何许物质？

香兰素能不能被添加进奶粉中呢？

有没有对其使用量的限定标准

以及如何利用色谱分析方法进行定量分析呢？

带着这些问题，

我们一起来了解一下这次事件的“元凶”。

香兰素是什么物质？

香兰素亦称香草素、香草醛等，学名为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，根据欧盟专家委员会2000年2月24日报道，大剂量可导致头痛，恶心，呕吐，呼吸困难，甚至损伤肝肾功能。

样品组分	结构式
香兰素

中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用标准》（GB2760-2014）规定，较大婴儿和幼儿配方食品中香兰素最大使用量为5 mg/100 mL，其中100 mL以即食食品计，生产企业应按照冲调比例折算成配方食品中的使用量；婴幼儿谷类辅助食品中可以使用香兰素，最大使用量为7 mg/100 g，其中100 g以即食食品计；凡使用范围涵盖0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料。

固相萃取-液相色谱法测定奶粉中香兰素

国家标准中只规定了限值，未有检测方法。本实验使用Cleanert^® PAX固相萃取小柱和Venusil^® XBP C18（L）液相色谱柱，建立了一种奶粉中香兰素的检测方法，经实验验证，该方法简单、快速、准确度高。

＋

实验方法

实验试剂和耗材	水（pH为4.5）；取100 mL水，用乙酸调节pH至4.5
	2%乙酸铅溶液：称取乙酸铅2 g，加水稀释并定容至100 mL
	5%氨水溶液：取氨水溶液5 mL，加水稀释并定容至100 mL
	5%酸化甲醇：取甲酸5 mL，加甲醇95 mL混匀
	香兰素储备液（1 mg/mL）：准确称取香兰素标准品10 mg，加水稀释并定容至10 mL
	固相萃取柱：Cleanert^® PAX（规格为60 mg/3 ml），使用前分别用3 mL甲醇和3 mL水活化
	液相色谱柱：Venusil^® XBP C18(L)（规格为5 µm 150 Å， 4.6 × 150 mm）
	针式过滤器：亲水型 PTFE（0.45 µm，13 mm）
仪器及设备	高效液相色谱仪
仪器及设备	12位固相萃取装置
试样处理	准确称取奶粉试样1 g于50 mL离心管中，加入pH为4.5的水溶液5 mL，混匀超声提取5 min，加2%乙酸铅溶液2 mL，混匀后静置2 min，8000 r/min离心10 min；取上清液用5%氨水溶液调节pH至中性；将上清液全部加样至活化好的Cleanert® PAX小柱，然后分别用3 mL 5%氨水溶液和3 mL甲醇淋洗小柱，弃去淋洗液；用3 mL 5%酸化甲醇洗脱（以上固相萃取操作通过Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪完成），收集洗脱液于30℃下氮气吹干，用1 mL流动相重新溶解，过滤，待测。
液相色谱条件	色谱柱：Venusil^® XBP C18(L)，5 µm 150 Å，4.6 × 150 mm
	流动相：A（0.02 mol/L的磷酸二氢钾溶液，磷酸调节pH为4.0）︰B（乙腈）= 90︰10
	流速：1.0 mL/min；进样量：20 µL；波长：276 nm；柱温：30℃
实验结果	线性关系和检出限

量取一定量香兰素标准储备液，分别用水稀释至1 µg/mL、5 µg/mL、10 µg/mL、25 µg/mL和50 µg/mL，按照检测条件依次进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合标准曲线方程，结果见表1：

表1. 香兰素标准曲线和检出限

准确度

表2. 5 µg/g添加回收实验结果

表3. 25 µg/g添加回收实验结果

＋

实验结论

实验表明，Cleanert^® PAX和Venusil^® XBP C18-L可以用于奶粉中香兰素的检测，本方法简单、快速、准确度高。

＋

实验图谱

图1 奶粉空白谱图

图2. 5 µg/g添加谱图

图3. 1 µg/g标准溶液谱图

订货

信息

名称	规格	订货号
Cleanert^® PAX 固相色谱柱	60 mg/3 ml， 50支/盒	AX0603
Venusil^® XBP C18-L 液相色谱柱	5 µm 150 Å， 4.6 × 150 mm	VX951505-L
保护柱芯	4.6 × 10 mm， 4/pk	VX950105-L
保护柱套	适用于 4.6 × 10 mm 的保护柱芯	CH-100
亲水PTFE 针式过滤器	0.45 µm， 13 mm，100/包	AS081345
一次性注射器	2 mL无针头， 100支/包	LZSQ-2ML
1.5 mL样品瓶	短螺纹棕色带书写处，100/PK	AV1111-0
1.5 mL样品瓶盖	100/PK	AV2100-A
氮吹仪	15位	NV15-G