2020-12-10 19:46:06 海能未来技术集团股份有限公司
每日穿梭于实验室的伙伴们,你使用分析仪器的熟练程度可能也就仅次于划拉手机屏幕的熟练度了。对于液相色谱,有些朋友会经常使用,但有些朋友使用的机会较少。下面一些关于液相色谱流动相的事儿,给可能熟知的你或者云里雾里的他~
1
流动相的特性
液相色谱的流动相又称为:淋洗液,洗脱剂。流动相组成改变,极性改变,可显著改变组分分离状况。
亲水性固定液常采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定相的极性,称为正相液液色谱法,极性柱也称正相柱。若流动相的极性大于固定液的极性,则称为反相液液色谱,非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。
2
流动相应具备的条件
理想的流动相应具备化学稳定性好;
对样品有较宽的溶解范围;
扩散性好即低粘度;
沸点适中;
与检测方法具有好的兼容性;
不损坏固定相和仪器;
易于获得纯品并且毒性低。
3
流动相的类别
按流动相组成分:单组分和多组分;
按极性分:极性、弱极性、非极性;
按使用方式分:固定组成淋洗和梯度淋洗。
常用溶剂:己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙 腈、水。
采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性,以改进分离或调整出峰时间。
4
流动相的选择
在选择溶剂时,溶剂的极性是选择的重要依据。
采用正相液-液分配分离时:首先选择中等极性溶剂,若组分的保留时间太短,降低溶剂极性,反之增加。 也可在低极性溶剂中,逐渐增加其中的极性溶剂,使保留时间缩短。
常用溶剂的极性顺序:
水(最大) > 甲酰胺> 乙腈> 甲醇> 乙醇> 丙醇> 丙酮> 二氧六环> 四氢呋喃> 甲乙酮> 正丁醇> 乙酸乙酯> 乙醚> 异丙醚> 二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>煤油(最小)
5
选择流动相应注意的问题
(1)尽量使用高纯度试剂作流动相,防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。
(2)避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏柱子。如使固定液溶解流失;酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。
(3)试样在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀并在柱中沉积。
(4)流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时,流动相不应有紫外吸收。
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