2020-12-03 16:52:19, 基泰生物 上海基泰生物科技有限公司
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色谱峰前延
正常峰与前延峰对比
前延峰又称前伸峰、伸舌头峰。前沿平缓,后沿陡峭的不对称色谱峰称前延峰。与非线性吸附等温线相对应的色谱峰,可能出现在前延峰。
当色谱峰的对称因子在0.95~1.05为正常峰;小于0.95为前延峰;大于1.05为拖尾峰。一般情况下,0.9~1.2的色谱峰均可被接受
属于液相异性峰常见现象
色谱峰前延可能的原因
强极性溶剂:
如果我们使用极性大于流动相的溶剂溶解样品,进样后,会发现由于样品溶剂极性太强,不能很快被流动相稀释,部分样品在完全稀释之前会快速通过色谱柱,最终导致色谱峰的扭曲。此现象常见于色谱图中较早流出的色谱峰。
进样量过大:
每一根色谱柱都有其最大样品承载量,当样品进样量过大超过色谱柱承载量时会出现峰前延的情况,其特点是减小进样量,峰形有较大的改善。
色谱柱老化:
色谱柱内的死体积也能够引起色谱峰前延,如长时间在高pH条件下使用会导致硅胶填料的溶解,柱床崩解,从而导致色谱峰前延。如图所示,在高pH条件下,使用初期色谱柱峰形对称,使用500次以后开始出现峰前延。
解决方案
减小进样量
降低样品浓度
更换新的色谱柱
适当升高柱温
使用合适的溶剂,可选用流动相溶解
改变色谱条件,例如延长出峰时间
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