当蛋白遇见色谱分离科学(四)- 糖型分析抗体与荧光试剂的净化

2020-09-26 20:37:38 艾杰尔-飞诺美(Agela & Phenomenex)


前几期我们分享了蛋白分析所需的bioZen WCX、SEC、C4色谱柱,本期为大家带来抗体糖型分析过程中抗体与荧光标记试剂净化的产品 – bioZen Glycan Clean UP 96孔板Agela Cleanert Hilic



N-糖基化是生物制剂尤其mAb上最常见的翻译后修饰,聚糖结构会影响药代动力学、药效学和免疫原性,因此糖基化是生物制剂的关键质量属性,N-糖的表征与糖型分析则是生物制剂研发生产过程中必不可少的部分。

2020版药典通则和指导原则新增内容 - 3130单抗N糖谱测定法。其中糖型分析的样品处理操作如下:

a. N糖的酶切,主要是为收集聚糖,采用PNGase F糖苷酶

b. 蛋白去除和N糖标记,获得相对纯度的糖并进行标记,乙醇醇沉法去除蛋白,2-AB标记聚糖,使得聚糖在检测器上获得更好的灵敏度


c. 标记后的N糖纯化,标记时标记试剂是过量的,上机检测前去除标记试剂有助于建立稳健的方法,采用凝胶过滤和固相萃取法。

艾杰尔-飞诺美提供完整的96孔板和萃取小柱与设备用于标记后N糖纯化。bioZen Glycan Clean UP采用创新的固相萃取(SPE)Hilic固定相,擅长保留和回收标记的N-糖链,为高通量样品荧光试剂的去除设计;Agela Cleanert Hilic固相萃取小柱,久为中国生物制剂企业所使用,体现较稳定的产品与良好的回收效果。


1


96孔板完整套装

装置

货号

说明

96孔板

真空萃取装置

AH0-8950

可兼容96孔板

/收集板/蛋白沉淀板

和过滤板

Presston 1000正压装置

AH1-7033

气动处理;流速一致;

安全易用与96孔板

(包括微孔板)

配套使用,

仅可兼容1ml小柱

(AH0-9055配套)

bioZen Glycan Clean UP 96孔板

8M-S009-NGA

转为N糖纯化设计,

良好的回收率


2


Agela Cleanert Hilic固相萃取小柱套装

装置

货号

说明

SPE小柱

真空萃取装置

VM24

真空面板刚性材质,

抗变型;

玻璃缸透明材质,

便于监控与清洁;

StopCock调节阀

用于精确控制

每支小柱流速

Cleanert Hilic小柱

根据需求选择

稳定的产品效果

与回收率


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