2020-07-13 00:21:10 梅特勒托利多
全球新冠疫情仍在蔓延,可靠的诊断检测是疫情监测和防控不可或缺的工具。新冠病毒(COVID-19)为单链RNA病毒,主要通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 进行分子水平检测,这就要求所采集样本的病毒RNA高度完整,才能获得准确的诊断。
“假阴性”
在检测方法和疫情发布的相关报导中,“假阴性”常被提及。假阴性结果可能导致:
已感染患者被判定为未感染者,没有采取隔离措施回到人群中,导致更多人感染,这对疫情防控是非常不利的。
造成假阴性的原因有哪些呢?
样本采集:
常规鼻咽拭子需用长棉签巧妙插入鼻孔并深入到鼻咽腔,采样手法/技巧、采样深度控制等都会影响样本中病毒含量,如果含量过低就会出现假阴性结果。
患者病程:
病毒载量会在患者病程中波动,在约两周的潜伏期内,即使正确采样,仍可能检测不到新冠病毒。
检测方法:
自疫情爆发以来,世界各地都在开发病毒检测方法和产品,但灵敏度和准确度会有差异,所以也可能导致假阴性的出现。
检测过程:
目前主流检测方法是基于分子水平的检测,若在检测中引入外源RNA酶和PCR抑制剂等生物污染物,会直接导致病毒RNA分解及PCR反应无法进行,造成假阴性。
RNA酶和PCR抑制剂影响RT-PCR过程
RNA酶和PCR抑制剂的存在为什么会造成假阴性呢?我们先来看一下RT-PCR的过程:
逆转录(RT):病毒单链RNA逆转录为单链cDNA(互补DNA);
聚合酶链式反应(PCR):单链cDNA通过DNA聚合酶合成双链cDNA(ds cDNA),然后指数级扩增。
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对于依赖RNA浓度水平的诊断测试,如果外源引入RNA酶和PCR抑制剂:
RNA酶:单链RNA不稳定,在痕量RNA酶存在时非常容易降解;RNA酶即使痕量也能在实验室环境中造成极大破坏。若检测中引入外源RNA酶,样本中的病毒RNA会被降解,模板浓度降低,导致假阴性。
RCR抑制剂:能够抑制PCR扩增反应的物质,导致扩增效率低。若检测中引入PCR抑制剂,PCR反应无法正常进行,导致假阴性。
BioClean Ultra™ 测试
瑞宁(RAININ) BioClean Ultra系列吸头产品,执行行业最严格且可验证的测试方法来检测生物污染物,包括RNA酶和PCR抑制剂,且方法公开。RAININ通过定量PCR (qPCR) 测试吸头是否存在可能降低RT-PCR保真性的污染物。
许多其他品牌制造商虽然也声明无生物污染物,但并不完整:
只标明 “不含RNA酶”,但未提供任何公开测试方法和检测限,在缺少任何指定检测限(LOD)的情况下,无法得出有关测试可靠性的任何结论;
测试结果不完整:
如只列出“KU (Kunitz Units)” 或 “飞克(fg)”,但不说明该污染物的具体情况或范围;
不对PCR抑制剂进行检测。
因此,新冠病毒COVID-19的检测可完全信任瑞宁(RAININ) 吸头产品。
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免费试用 好礼相送
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