2020-06-20 16:22:11 北京东西分析仪器有限公司
人参
人参是多年生草本植物,是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明,人参内含有一种叫人参皂甙(Ginsenoside,简称GS)的化学物质,它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效,是人参的主要活性成分。
现已明确知道的GS单体约有40余种,如Re、Rg、Rf、Rb、Rc等。因此人参皂甙的含量是评价人参质量的重要指标。《中国药典》和GB/T 22996-2008均采用液相色谱法对人参中人参皂甙的成分及含量进行测定,有利于全面、有效的评价人参的质量。
本文对比了2015版《中国药典》和《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》两种分析方法对6种主要人参皂甙的测定。
实验部分
实验设备和试剂
LC-5510液相色谱
P-101A高压输液泵
LC-5510紫外检测器
LC-5510柱温箱
DM-101在线脱气机
人参皂甙对照品(Re,Rg1,Rf,Rb1,Rc,Rb2)
人参粉样品
甲醇(色谱纯)
乙腈(色谱纯)
样品处理:
色谱条件1:
参照《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》
色谱柱:C18柱,250mm×4.6 mm,5μm
流速:1mL/min
柱温:45℃
检测波长:203nm
进样量:20μL
流动相:A:乙腈;B:水,按表1梯度洗脱
表1 梯度洗脱程序
图1 色谱条件1—人参皂甙标样谱图
图2 色谱条件1—人参样品谱图
表2 色谱条件1人参皂甙的保留时间列表
色谱条件2:
参照2015版《中国药典》
色谱柱:C18柱,250mm×4.6 mm,5μm
流速:1mL/min
柱温:35℃
检测波长:203nm
进样量:20μL
流动相:A:乙腈;B:水,按表3梯度洗脱
表3 梯度洗脱程序
图3 色谱条件二人参皂甙标样谱图
图4 色谱条件2—人参样品谱图
表4 色谱条件2人参皂甙的保留时间列表
结论与讨论
《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》标准中的分析方法,Re和Rg1不能完全分离,但分析方法时间短,仅需30min.
《中国药典》的参考方法各组分离度较好,但是分析时长需要100min。
通过实验结果与《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的方法比较,说明:
提高柱箱温度可以缩短分析时间;
不同厂家的色谱柱对人参皂甙的分离有差异;
增加有机相(乙腈)比例,可明显缩短分析时间;
在增加乙腈比例缩短分析时长的同时,会影响到人参皂甙各组分的分离度,并且人参样品中的其他组分会影响目标组分的分离;
《GB/T22996-2008 人参中多种人参皂甙含量的测定 液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的分析方法还可进行优化,在保证满足分离度的情况下,通过调整流动相梯度程序和柱温,可进一步改善分析方法,缩短分析时间。
关
于
我
们
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