超能打！看这家公司如何运用MAM化繁为简

2020-06-12 13:43:14 沃特世科技（上海）有限公司

治疗类抗体药物分子量大、结构复杂，包括有单抗、抗体融合蛋白、抗体片段、抗体偶联药物、多功能抗体等。一般由细胞重组表达，不同的理化因素会使其在生产过程中发生诸如糖基化、氧化、糖化、脱酰胺、异构化及端基环化等修饰，形成翻译后修饰(Post-translational Modification, PTMs)变异体，导致产品在糖型、电荷、半胱氨酸、相关氧化物、大小、微量突变等方面存在差异。这些变异体作为产品质量相关属性(Product Quality Attribute, PQA)的一部分，可能对产品的功能产生影响。^[1]

CQA监控传统方法

为了更好地对关键质量属性(Critical Quality Attribute, CQA)甚至PQA进行控制，进而保障治疗类抗体药物的质量，目前常用的QC方法包括：毛细管电泳法、离子交换色谱法、亲水色谱法、反相高效液相色谱法、体积排阻色谱法或疏水相互作用色谱法等。这些方法通常分别用于分析不同的PQA，如：还原SDS毛细管电泳用于分析剪切变异体，离子交换色谱用于分析电荷变异体，亲水色谱用于分析寡糖分布。^[1]

MAM新理念

近年来，质谱(Mass Spectrometry, MS)技术已经广泛用于治疗类抗体药物PQA及潜在CQA的表征，以评估工艺变更后的产品差异及对产品质量安全性及有效性的影响、鉴别假药、研究药物药效学/药代动力学、确认早期药物研发中的CQA等。^[1]

随着MS分辨率、质量精度等检测性能的提升以及半自动化数据处理软件的开发，目前出现了基于MS的多属性分析方法（Multi-Attribute Method, MAM）。MAM是以表征阶段获得的液相-高分辨质谱分析数据为基础，将与该蛋白分子微观结构（如糖基化、氧化、脱酰胺等翻译后修饰、三硫键）或者工艺变化相关的质量属性建成一个包含高分辨质谱信息的数据库，然后利用LC-HRMS对关注的质量属性进行有目标性的监测（包括定性和相对定量）。

该方法通过MS分析治疗类抗体药物的肽段，可以对包括糖基化、氧化、脱酰胺、异构化、C末端赖氨酸缺失在内的诸多PQA进行定量分析，反映PQA在变异体、多批次稳定性样品、工艺开发与变更样品中的变化。MAM还具有杂质分析功能，为药品的质控提供更加快速和全面的分析，有望在未来替代还原SDS毛细管电泳、亲水色谱、离子交换色谱等多种传统方法。

关键质量属性（CQAs）监控所采用的MAM方法 Vs. 传统方法

案例分享

拓展高性能的LC-MS技术进入产品属性监测分析，跨越生物药物的开发、生产和质量控制，超越传统LC-MS扮演的表征角色，一直在持续进展中。作为一种新方法，MAM用于治疗类抗体药物质量控制(Quality Control, QC)正处于快速发展阶段。

为了更好地借鉴行业领先者在实施多属性方法（MAM）方面的思路和经验，沃特世联合LCGC、BioPharm International、默克雪兰诺公司（Merck Serono）举办网络讲座，讲解高性能LC-MS对生物药分析的应用与不同阶段的考量因素，包括将产品表征知识过渡到产品及生物分子过程相关质量属性的监测。默克雪兰诺公司（Merck Serono）将分享：

MAM这一分析技术和工作流程的评估细节；

评估这些新分析方法带来的益处和对组织的价值；

展示在其组织不同功能部门（开发、制造和质量控制）中部署MAM的计划。