珀金埃尔默专业检测，“乳”此简单 | 奶牛乳房炎的检测

2020-05-21 21:34:40 珀金埃尔默企业管理（上海）有限公司

点击“珀金埃尔默”关注我们，了解更多前沿资讯！

一

背景

奶牛乳房炎是困扰奶牛养殖业三大疾病（乳房炎、子宫炎、肢蹄病）之首。奶牛乳房炎是由于奶牛乳腺组织受到物理、化学、微生物刺激所发生的一种炎性反应。根据导致奶牛乳房炎病原微生物分离培养方面的资料显示，引起乳房炎的病原菌主要以金黄色葡萄球菌、链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌为主，占到引起乳房炎病院的90%左右。

奶牛乳房炎至今发病率仍相当高，广泛存在于世界各地，不仅降低奶牛产奶量和乳品质，给奶牛饲养业造成巨大经济损失，严重威胁奶牛业的发展，而且还影响到乳品食用者的健康。

及时准确地对奶牛乳房炎做出早期诊断，不仅可以保证奶牛的健康，也降低了牛奶的生产成本，避免抗生素滥用所造成的的乳制品安全问题。

如何对奶牛的乳房炎进行检测和诊断呢？

二

牛奶体细胞

体细胞数简称为SCC，通常以每毫升牛奶千个细胞来计数。近年来很多国家将体细胞数（ＳＣＣ）作为原料奶收购的标准之一。影响牛奶体细胞数的因素很多。一般来说，传染性乳房炎是微生物引起体细胞数增加的主要原因。当乳房外伤或发生疾病产生炎症时，机体将大量的白细胞分泌进入乳房以清除感染。

牛奶体细胞数不可能为零，但多数牛群可以将牛奶体细胞数控制在15万以下，这就表明牛群隐性乳房炎发病率很低，乳腺组织损伤小，产奶量高，牛奶质量好。 因此，可以通过检测乳汁中体细胞的多少来判断奶牛是否患有乳房炎，尤其对隐性乳房炎的检测非常实用有效。绝大多数专家、兽医认为，体细胞数在20万个/mL以内为正常。

而且随着牛奶中体细胞数增加，牛奶中不受欢迎的脂肪酶及血纤维蛋白酶含量增加。脂肪酶分解脂肪，产生酸败气味，阻止酸奶乳酸菌繁殖，并且减少奶制品存储时间。血纤维蛋白酶减少牛奶中酪蛋白含量，并且减少干酪产量。即使在冷藏条件下，这些酶仍然发挥作用。体细胞数增加还会使牛奶中的营养成分如乳脂、蛋白质、乳糖明显下降。

牛奶体细胞数的检测

（1）基于流式细胞原理的牛奶体细胞快速测定仪（如PerkinElmer公司的CombiScope型体细胞分析仪）：其工作原理是利用流式细胞计数（Flowcytometry）技术将被测定的细胞染色并置于悬浮液体之中，然后强迫细胞逐一通过一个非常窄小的缝隙管道。同时，向其发出特殊光束，使得每一个染色后的细胞在通过测定点时也发出回应光束脉冲信号，采用电子技术，再将其脉冲信号记录下来。利用电脑将所记录的脉冲信号处理，从而达到对牛奶中细胞自动计数。

Combiscope型体细胞分析仪

（2）CMT试验：将被检牛的4个乳区的乳，分别挤在诊断盘的4个小室内，倾斜诊断盘，倒出多余乳，使每个小室内保留乳汁2毫升，分别加入2毫升试剂于小室内，呈同心圆摇动诊断盘，最后判定结果。

流式细胞技术（如PerkinElmer公司的CombiScope型体细胞分析仪）和CMT试验是目前临床上最常用的牛奶体细胞测定方法。流式细胞技术测定的一般是奶牛四个乳头的混合奶样，因而不能决定哪一个乳头感染；CMT试验操作简单，价格便宜，能够快速判断那个乳头感染。

三

奶牛乳房炎致病因子检测

引起乳房炎的病原菌有很多种，当知道奶牛患乳房炎后，为了更好的治疗，需要及时准确地对奶牛乳房炎致病因子进行检测。

传统的细菌生化实验操作复杂、耗时耗力。因此研发出一种操作简单、快速省力方法，成为奶牛养殖业的需求，符合当前发展形势。

良润生物提供奶牛乳房炎鉴定平板和核酸检测试剂盒两种检测手段。

奶牛乳房炎鉴定平板

原理>▷

在分离培养基中加入检测某些菌种的特异性酶底物,该底物为人工合成，由发色基团和微生物可代谢物质组成，通常为无色，但在特异性酶作用下游离出发色基团并显示一定颜色，直接观察菌落颜色即可对菌种做出鉴定。

操作步骤>▷

•样本采集

•平板划线

•培养判读

优势>▷

	传统方法	鉴定平板
时间	3-5天	18-24H
培养基种类	种类繁多	仅需一种（双格板/三格板）
结果判读	不易	简单
分离检测到种	否	是
试验步骤	繁琐	简单，易操作
用药指导	宽泛	精准治疗

奶牛乳房炎鉴定平板结果显示

核酸检测试剂盒

原理>▷

实时荧光PCR技术，针对奶牛乳房炎病原菌的特性基因设计引物探针，实现核酸水平上的定性检测。

操作步骤>▷

•样本采集

•核酸提取

•上机检测

优势>▷

参数	细菌培养	PCR
检测样本	细菌菌落	DNA（细菌、真菌、支原体）
毒力因子检测	有局限性（如溶血素）	适用于存在PCR引物
影响因素	培养基和生长条件；培养时间；接种量/检测限；结果解释	引物；引物特异性；CT阈值；结果解释
操作便利性	前期操作简单，后期确定步骤多	需要配套仪器，操作要求高
结果解释	得到的菌株需要生化或者分子等方法确认	确认方法
时间	24h到10d	2-4h
成本	低	常规培养法的4到5倍
检测项目	7-9种	16种以上，检测项目多

产品列表>▷

产品名称	产品编号	产品规格
细菌基因组DNA提取试剂盒	LR79003	50T／盒
金黄色葡萄球菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-005	50T／盒
葡萄球菌属核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-006	50T／盒
无乳链球菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-007	50T／盒
停乳链球菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-008	50T／盒
乳房链球菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-009	50T／盒
大肠埃希氏菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-010	50T／盒
肠球菌属核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-011	50T／盒
克雷伯菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-012	50T／盒
牛棒状杆菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-013	50T／盒
粘质沙雷菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-014	50T／盒
化脓隐秘杆菌和吲哚嗜胨菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-015	50T／盒
葡萄球菌β-内酰胺酶基因检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-016	50T／盒
牛支原体核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-017	50T／盒
支原体属核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-018	50T／盒
酵母菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-019	50T／盒
原壁菌属核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-020	50T／盒
16联牛乳房炎病原菌核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-021	50T／盒
奶牛乳房炎病原菌（无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、牛支原体）三联检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-D0011	50T／盒
奶牛乳房炎病原菌4联核酸检测试剂盒1（PCR-探针法）	BMT-D0012	50T／盒
奶牛乳房炎病原菌4联核酸检测试剂盒2（PCR-探针法）	BMT-D0013	50T／盒
奶牛乳房炎病原菌8联核酸检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-D0014	50T／盒
奶牛乳房炎病原菌12核酸联检测试剂盒（PCR-探针法）	BMT-D0015	50T／盒
革兰氏阴性菌/革兰氏阳性菌鉴定平板	BMT-3001	20T／盒
金黄色葡萄球菌/B族链球菌鉴定平板	BMT-3002	20T／盒
牛支原体分离平板	BMT-3003	20T／盒
乳房炎致病菌鉴定平板 1	BMT-3004	20T／盒
乳房炎致病菌鉴定平板 2	BMT-3005	20T／盒
乳房炎致病菌鉴定平板 3	BMT-3006	20T／盒
乳房炎致病菌鉴定平板 4	BMT-3007	20T／盒