2020-04-13 11:02:24 东曹(上海)生物科技有限公司
近日,东曹生命科学面向生物大分子纯化领域推出了SkillPak工艺开发用预装层析柱,可快速实现纯化方法的开发及优化、填料筛选以及样品的浓缩。
SkillPak层析柱有1 mL和5 mL两种规格,其中预装填了各种分离模式的TOYOPEARL层析填料及羟基磷灰石填料,能够对单克隆抗体、蛋白质、寡核苷酸及病毒进行出色的纯化评价、评估。
这类层析柱是为从平台工艺开发到中试规模纯化而设计,一经收到即可投入使用,由于具有优异的刚性强度和理想的压力/流速特性,非常适合下游纯化工艺。
SkillPak层析柱的适用范围
实验设计 (DoE) 是评价各种条件参数设定如何影响实验结果的系统方法,是一种以最少实验次数获取最佳实验条件的技术。为了定义各参数可变范围,需要进行初筛实验。DoE可用于参数筛选、优化以及方法耐用性测试。
在开发纯化工艺的初期考虑包括环境限制在内的各种变量非常重要。SkillPak层析柱非常适用于开发新的或替代性纯化工艺时进行参数、方法的优化以及耐用性测试工作。
mAb纯化工艺开发应用示例(一)
使用SkillPak层析柱确定mAb的洗脱pH值
在mAb纯化工艺中,找到适合mAb洗脱的缓冲溶液和pH值,可降低样品中聚集体增加的风险。为了确定mAb结合和洗脱的最佳条件,我们将含杂交瘤细胞培养上清液的mAb进样至预装了AF-rProtein A HC-650F填料的SkillPak层析柱中。
图A和图B显示出,使用线性pH值梯度洗脱在pH 4.0时获得尖锐的mAb组分峰。为了最大程度地提高回收率,可选择pH 3.5进行步阶式洗脱。
mAb纯化工艺开发应用示例(二)
使用SkillPak层析柱捕获完整抗体
将340 mL杂交瘤细胞培养上清液进样至预装AF-rProtein A HC 650F填料的5 mL SkillPak层析柱中。在pH 5.0下经短暂淋洗后,可在pH3.5下洗脱开始时获得一尖锐有效的洗脱峰。收集洗脱组分峰并计算得mAb的总回收量为9.8 mg。
SkillPak层析柱装填性能
SkillPak层析柱预装了各种层析工艺填料,具有出色的压力/流速曲线,可与常用的低压或中压液相色谱/层析系统配合使用。小巧的预装柱,不仅可以降低层析填料成本、节省宝贵的样品,而且还具有放大至大型制备工艺层析柱时相似的纯化性能指标。
如果您对SkillPak预装柱产品感兴趣,欢迎联系我们申请免费试用!
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