咖啡及制品中葫芦巴碱的含量测定

称取试样0.5g（其中生咖啡0.2g，精确到0.01g）于100mL烧杯中，加入80mL沸水。盖表面皿，置于电热板上煮沸提取30min，冷却至室温，转移到100mL容量瓶中，加入1mL磺基水杨酸溶液，摇匀，水定容至刻度。上清液用水相0.45μm滤膜过滤，收集滤液上机测定。

色谱柱：TSKgel Amide-80 HR（5μm, 4.6mmI.D.×25cm）

流动相：甲醇+水（88+12）

流   速：0.8mL/min

柱   温：25℃

检测器：UV@260 nm

进样体积：10μL

图1. 葫芦巴碱对照品色谱图

图2. 咖啡提取液色谱图

色谱图中，咖啡提取液中葫芦巴在色谱柱上有较强的保留并与其他提取成分色谱峰有很好的分离，经计算得该咖啡样品中葫芦巴碱含量为0.58g/100g。

采用上述方法，使用TSKgel Amide-80 HR (5μm，4.6mmI.D.×25cm) 色谱柱，可以满足NYT 3012-2016中对咖啡及制品中葫芦巴碱分析测定要求。