换颜色=换心情？当心染发剂中的有害化学成分

本方案适用于化妆品染发剂中32种禁限用染料的检测。

单标储备液：准确称取各待测化学成分标准品50 mg (精确至0.1 mg)，置于10 mL容量瓶中，用甲醇-2 g/L亚硫酸氢钠水溶液(1:1 v/v)的混合溶液溶解并定容，分别制成5 mg/mL的单标储备液。部分标准品在上述混合溶液中溶解性较差，采取的措施如下：甲苯-2,5-二胺硫酸盐和2-氯-p-苯二胺硫酸盐用2 g/L亚硫酸氢钠水溶液溶解并定容，浓度均为5 mg/mL；甲苯-3,4-二胺和4-硝基-o-苯二胺用甲醇溶解并定容，浓度均为5 mg/mL；2-硝基-p-苯二胺用无水乙醇溶解并定容，浓度为2.5 mg/mL。所有单标储备液需保存在-20 ℃的冰箱中，保存期限为1个月。

混合标准溶液：将32种待测化学成分分为两组，分别准确移取单标储备液适量置容量瓶中，用2 g/L亚硫酸氢钠水溶液定容至刻度，配制成目标浓度的混合标准溶液，同样保存在-20  ℃的冰箱中，保存期限为1个月。可根据需要对此混合标准溶液继续稀释，配制成系列浓度的混合标准工作溶液，现用现配。

色谱柱: Spursil^® C18, 250 x 4.6 mm,3 μm 

(Cat.No.: 82020)

仪器: Agilent 1260液相色谱仪配紫外检测器

流速: 1.0 mL/min

进样量: 5 μL

柱温: 35 ℃

检测器: UV 280 nm

流动相Ⅰ: 40 mM磷酸二氢钾(pH 2.8) + 10 mM辛烷磺酸钠缓冲液 (A)-乙腈+甲醇(40+60)(B)

梯度设置

流动相Ⅱ: 40 mM磷酸二氢钾(pH 2.8) + 10 mM辛烷磺酸钠缓冲液(A)-乙腈(B)

梯度设置

如上，32种化学成分被分为两组，这两组待测物均在迪马Spursil^® C18色谱柱上得到了很好的分离（见图2和图3），其洗脱顺序、保留时间、分离度和不对称因子如表1和表2所示。几乎所有待测物的色谱峰与相邻峰都达到了基线分离，分离度为1.25以上。除了２-甲基间苯二酚、苯甲基吡唑啉酮和2-氨基-3-羟基吡啶（不对称因子小于1.5）以外，其余待测物的峰形都几乎完美对称，不对称因子为0.85～1.16。