2019-09-03 14:11:17, Bruker中文博客 布鲁克磁共振事业部(Bruker Magnetic Resonance)
核磁共振(NMR)成像,尽管能够清楚地观察固体化合物中的结构组成,但仍存在局限性。动态核极化(DNP)的使用正在迅速成为研究中的重要辅助手段,帮助增强NMR固有的光谱灵敏度。
在固体NMR光谱中,DNP能在较大的频率范围内促进更高的信号强度,从而进一步了解生物和小分子化合物的解剖学结构。
DNP具有一系列的广泛应用,包括研究蛋白质、膜蛋白和原纤维的生物结构。固体DNP-NMR的另一个常见应用是有关小有机分子,这是一项特别适用于制药工业的应用。纳米粒子、催化剂、生物材料、官能化二氧化硅、介孔样品,以及天然和合成聚合物等材料也可采用DNP- NMR光谱研究。
No.1
DNP-NMR在生物样品中的应用
膜蛋白图解
DNP-NMR可用于研究并表征通道蛋白,包括KcsA钾通道和M2质子通道。具体来说,它可以用于高度复杂环境中的结构生物学表征。
其它应用包括:
淀粉样原纤维
膜蛋白:细菌视紫红质、光视紫红质
肽:疫苗,自组装肽
细胞壁:细菌、植物
研究人员可能需要使用固体NMR以研究并鉴定蛋白质纤维的解剖结构。在这种情况下,为帮助提高NMR的灵敏度,可以采用DNP。DNP还可以增强对完整细胞(如细菌细胞)中所包含的细胞壁聚合物的研究。
在一项研究中,研究人员采用Bruker光谱仪,应用DNP增强NMR来检查淀粉样纤维的链内结构。其结论是,DNP增强产生了有关玻尔兹曼极化附加因子3,同时改善了分子间相关性的检测,且未显著减弱光谱分辨率。
另一项研究是利用DNP以增强NMR对生物膜静态样品的研究。与室温样品相比,DNP的应用使NMR得到了40倍的增强,其结果是比无DNP增强的NMR节省了1600倍的时间。
No.2
DNP与小有机物分子
DNP应用的一个新发展领域是药物化合物的表征。DNP-NMR波谱仪可以帮助研究人员快速辨别药物配方中的成分,有助于提高药物开发和上市速度,而不会有损于其安全性或有效性。
对于商用药物制剂,DNP还可以提供快速准确的2D 1H-15N相关光谱数据采集,并可以探测药物基质与药物分子之间的相互作用。
Bruker DNP-NMR光谱仪已广泛应用于药物化合物的分析。以9.4 Tesla的磁感应强度水平,使用Bruker光谱仪对固体NMR波谱进行DNP增强,特别有助于在解剖学水平上提供药物剂型的详细表征。
药物片剂通常被粉碎并注入二元极化剂,以防止实验对制剂造成显著改变。DNP实验能以同位素丰度快速采集药物的一维和二维固体NMR波谱。
No.3
Bruker DNP-NMR光谱仪
Bruker光谱仪被设计用于增强固体NMR实验中的灵敏度,同时可实现更短的信号持续时间和更长的实验。它们通过高功率回旋管系统传输极化,通过频率分别为263GHz、395GHz和527GHz的微波辐射将信号从20增强到200倍。
该系统可用于研究范围广泛的生物材料和小分子,有助于在制药、生物和材料科学中对复杂化合物进行观测。
参考文献
Rossini AJ、Widdifield CM、Zagdoun A等;“用于药物制剂的动态核极化增强NMR波谱”;J Am Chem Soc.;2014;136(6):2324-2334。
Akbey Ü、Oschkinat H;“固体MAS DNP NMR的结构生物学应用”;J MagnReson ;2016 AUG;269:213-224。
Bayro MJ、Debelouchina GT、Eddy MT等;“用魔角旋转和动态核极化NMR测定淀粉样纤维的分子间结构”;J Am Chem Soc.;2011;133(35):13967-13974。
Salnikov ES、Aisenbrey C、Aussenac F等;“利用动态核极化/固体NMR光谱检测PGLa抗菌肽的膜拓扑结构和跨膜锚定序列”;Sci Rep. ;2016;6:20895。
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