CNW C系列免疫亲和柱&CNW ELISA 检测试剂盒联袂登台！

安谱实验针对真菌毒素等，成功开发了CNW C系列免疫亲和柱，主要应用于黄曲霉素总量，黄曲霉素B1, 黄曲霉素M1, 赭曲霉素，呕吐毒素和玉米赤霉素等毒素的提取和净化。

而酶联免疫吸附法已作为一个成熟的快速筛选方法，广泛用于许多领域，美国USDA，EPA将众多ELISA的方法作为官方快速筛选方法，2017年新制定的食品检测国标中也引入了多个项目的ELISA检测方法。安谱实验推出CNW ELISA检测试剂盒，该产品灵敏度高，同时大大缩短分析周期，节省时间！

CNW C系列免疫亲和柱

检测原理：

CNW 免疫亲和柱中含有特异性抗体紧密附着在载体上，这些抗体可以与样品中的毒素特异性结合，保存在免疫亲和柱中，进一步洗脱可以得到待检测的毒素。适用于浓缩和纯化粮食、坚果或者牛奶等复杂基质中的毒素样品的提纯。

特点：

✔特异性强，柱容量大；

✔ 简单，方便，安全，环保。

注意事项：

1、2-8℃保存，使用前需要回温到室温24-28℃，最佳温度25℃。

2、复杂基质如高蛋白、高油脂、酸性样品可将提取液分两次提取提高提取效果。

产品信息：

CNW ELISA 检测试剂盒

检测原理：

载体上包被抗原或抗体后，通过抗原抗体反应使酶标抗体或抗原结合到载体上，使结合的酶标抗体或抗原和游离的酶标抗体或抗原分离，洗去游离的酶标抗体或抗原，加入底物显色，根据颜色深浅定性或定量。

1）抗原/ 抗体；

2）酶标记抗原/ 抗体；

3）酶反应的底物

特点：

✔灵敏度高，特异性强

✔分析周期短，检测量大

✔准确度高，可定量分析

✔ 检测成本低

注意事项：

1、2-8℃保存，试剂盒中试剂均需达室温后方可使用。

2、不同批次间产品不可混用。

产品信息：

应用一：胶囊内容物、核桃粉的黄曲霉毒素B1检测

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一、前处理

SNEQ-C11013 ，黄曲霉毒素B1检测试剂盒（高敏），96孔/ 盒

1、取粉碎好的胶囊内容物样品2g，加入0.2gNaCl，20ml 70% 甲醇/ 水，4ml 正己烷震荡混匀3分钟，4000转离心5分钟，去除正己烷层，取下层提取液进行检测。

（胶囊为高油脂类样品，因而在提取过程中直接加正己烷进行除脂）

2、取核桃粉样品4g，加入0.4gNaCl，10ml 70% 甲醇/ 水，震荡混匀3分钟，4000转离心5分钟，取上清液过玻璃纤维滤纸。然后再取上清液100ul加入到900ul70% 甲醇/ 水中，混合待测。

（核桃粉为高油脂样品且本身基质干扰大，因而提取完以后要经过去酯及加大稀释倍数来降低基质干扰）

二、检测

1. 开始实验前要求试剂及样品萃取液达到室温。

2. 取适量的孔条固定在微孔板架上，未使用的孔条，放入密封袋中保存。

3. 加入100ul的酶标记物到每个混合孔中。

4. 再加入50ul的标准品及样品到相应混合孔中，混匀后用移液器转移100ul到相应的测试孔中。

5. 加入50ul抗体到对应的每一个测试孔，室温下孵育10分钟。

6. 倒掉微孔中溶液，微孔中注满清洗液，然后倒掉，重复3次，共四次洗板。

7. 最后一次清洗完后，倒掉孔中溶液，然后翻转微孔板在吸水纸上拍干。

8. 每孔中加入100ul的底物溶液。

9. 室温下孵育8分钟。（可根据颜色深浅适当延长缩短显色时间）

10. 每孔中加入100ul停止液。

11.450nm读吸光度值。

三、实验结果

应用二：高效液相色谱法检测咖啡及其制品中的赭曲霉毒素A

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赭曲霉毒素是继黄曲霉毒素后又一个引起世界广泛关注的霉菌毒素，它包括7 种结构类似的化合物，其中以赭曲霉毒素A 的毒性最大、分布最广、产毒量最高、对农产品的污染最重、与人类健康关系最为密切，因此准确测定食品中的赭曲霉毒素A 对粮食储存和保证人类身体健康具有重要意义。

根据GB 5009.96-2016食品中赭曲霉毒素A 的测定，有五种有效的检测方法可以对食品中的赭曲霉毒素A 进行测定，其中免疫亲和层析净化液相色谱法检测食品中赭曲霉毒素A 为目前国内应用最为广泛、最权威的方法，具有高效、准确性好、灵敏度高、检测限低等特点。

一、前处理

速溶咖啡：称取5.0000g样品（误差小于0.001）到50ml离心管，添加1g氯化钠（加标使得最终上机检测浓度5ppb）, 量取25ml80% 甲醇水溶液两次提取（25ml 分成13ml、12ml两次提取，合并提取液），剧烈震荡3min，4000r/min 离心5min，取上清液6ml，加54ml稀释液进行稀释，玻璃纤维滤纸过滤，得到滤液A；

咖啡豆：样品粉碎均匀，称取5.0000g样品（误差小于0.001）到50ml离心管，添加1g 氯化钠（加标使得最终上机检测浓度5ppb），量取25ml80% 甲醇水溶液提取（由于咖啡豆提取后上层有一层漂浮物，所以没有进行两次提取），剧烈震荡3min，4000r/min 离心5min，取上清液6ml，加54ml稀释液进行稀释，玻璃纤维滤纸过滤，得到滤液B；

二、SPE 操作

上样：分别准确移取50ml 滤液A 与滤液B 至注射器中，将注射器与空气压力泵相连接，调节压力，使溶液以1 秒/ 滴的流速分别通过免疫亲和柱，直至空气进入免疫亲和柱中。

淋洗：依次用10ml淋洗缓冲液、10ml水淋洗免疫亲和柱，弃去全部滤液，真空抽干。

洗脱：准确加入1.5ml甲醇到免疫亲和柱进行洗脱，流速约为1 滴/ 秒，收集全部洗脱液到干净的试管中，1ml洗脱液45℃下氮气吹干，1ml流动相复溶（空白200ul复溶），过0.45um滤膜，供检测用。

三、仪器

色谱柱：C18 柱子，LAEQ-461572，柱长150mm，内径4.6mm，粒径5um，或等效柱

b. 流动相：乙腈：水：冰乙酸（99:99:2）

c. 流速：0.9ml/min

d. 柱温：35℃

e. 进样量：20ul

f. 检测波长：激发波长333nm，发射波长477nm

四、实验数据

五、实验谱图

图1、80% 甲醇水咖啡豆5ppb谱图

图2、速溶咖啡5ppb谱图

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