大揭秘!正相、反相HPLC法完全分离4种维生素E

2019-02-19 17:47:22, DIKMA


维生素E(Vitamin E)是一种脂溶性维生素,其水解产物为生育酚,是最主要的抗氧化剂之一。维生素E有许多同系物,其中以4种异构体(即α/β/γ/δ-维生素E)的活性最高。

目前维生素E常用的分析方法有分光光度法、荧光光度法、高效液相色谱法和气相色谱法等。其中HPLC法因具有快速、准确、样品处理简单以及分辨率高等优点而成为维生素E测定的首选方法。HPLC法测定维生素E既可以采用正相HPLC法也可以采用反相HPLC法,《GB 5009.82-2016 食品安全国家标准 食品中维生素A、D、E的测定》对两种方法都有规定。

迪马科技参照GB 5009.82-2016标准,建立了正相、反相两种HPLC检测方案,实现了4种维生素E异构体完全分离。详细检测方案如下:

第一法 维生素E的测定 反相HPLC法

1

样品制备

制备方法

混  标:α-维生素E、β-维生素E、γ-维生素E、δ-维生素E

浓  度:10 μg/mL

溶  剂:甲醇

2

分析条件

色谱柱:Inspire PFP 250 x 4.6 mm, 5 μm (Cat.# 81606)

流动相:A:水       B:甲醇  

流    速:0.8  mL/min

柱    温:30  ℃

检测器:294 nm

进样量:10  μL

梯度设置:

3谱图

第二法 维生素E的测定 正相HPLC法

1

样品制备

制备方法

混标:取一定量浓度分别为2000 μg/mL, 1000 μg/mL,1000 μg/mL, 1000 μg/mL的α,β,γ,δ-维生素E标准储备液于试剂瓶中,用氮气吹干,加流动相定容为10 μg/mL的中间液;将维生素E中间液用流动相稀释成浓度为1 μg/mL的混标,待上机。

2

分析条件

色谱柱:Platisil Silica 250 x 4.6 mm, 5 μm (Cat.# 99509)

流  动  相:正己烷 : 1,4-二氧六环=95:5

流        速:0.8  mL/min

柱        温:30  ℃

进  样  量:10  μL

激发波长:294  nm

发射波长:328  nm

3谱图

维生素E的测定相关产品信息

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