农业行业标准︱HPLC-UV法检测稻米中γ-氨基丁酸的含量

提取液配制：无水乙醇+水=4+1（V+V），取400 mL无水乙醇和100 mL水混匀。

碳酸氢钠溶液配制：称取0.40 g碳酸氢钠，用水溶解并稀释至10 mL.

4-二甲基胺基偶氮苯-4-磺酰氯衍生试剂溶液配制：称取4-二甲基胺基偶氮苯-4-磺酰氯20.0 mg，用乙腈溶解并稀释至10 mL

标准储备溶液：精确称取γ-氨基丁酸标准品10.0 mg，用提取液溶解并定容至10 mL，即为1000 mg/L的标准溶液。

标准使用液：将标准储备溶液逐级稀释成2.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、50.0 mg/L、100.0 mg/L不同浓度的标准使用液。

试样提取：分别称取一定量的样品（约1 g）于50 mL离心管中，加入10 mL提取液，超声30 min后，摇匀，静置5 min，于5000 r/min离心5 min，将上清液转入25 mL容量瓶中，样品残渣再用10 mL提取液提取一次，合并2次提取液，用提取液定容至25 mL，摇匀，待衍生化。

衍生化：准确吸取1 mL试样或标准工作溶液于具塞试管中加入0.2 mL碳酸氢钠溶液和0.4 mL 4-二甲基胺基偶氮苯-4-磺酰氯衍生试剂，混匀后在70℃水浴中衍生反应20 min，用微孔滤膜过滤，待测。

1）色谱图

2）线性关系考察

将10μL标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，在所述色谱条件下测定标准溶液的响应值（峰面积），以标准工作液的浓度为横坐标，以响应值（峰面积）为纵坐标，绘制标准曲线： 

采用EasySep®-1020液相色谱系统，配备UV检测器，可以实现稻米中γ-氨基丁酸的测定，方法准确、灵敏度高，可以满足日常分析要求。