在线μSPE-GCMS法检测血液中26种有机磷

前言

有机磷农药（OPS）是我国使用广泛、用量最大的杀虫剂。主要包括敌敌畏、对硫磷、甲拌磷、内吸磷、乐果、敌百虫、马拉硫磷等。急性有机磷农药中毒（AOPP）是指有机磷农药短时大量进入人体后造成的以神经系统损害为主的一系列伤害。每年全世界有数百万人发生AOPP，其中约有30万人口死亡，且大多数发生在发展中国家。有机磷农药中毒在化学中毒事件中占了很大比例，并多为急性中毒，快速准确定性鉴定和定量测定中毒化学物和含量，将为中毒病人的临床救治和中毒原因调查提供科学依据。

血样的前处理技术直接影响到方法的灵敏度和准确度，现在常用常规SPE小柱对血样进行净化处理。常规SPE小柱手动使用的话费时费力，每天的样品处理量也很有限，而且实现不了和分析仪器如气质的联用。LabTech AStation全自动多功能样品制备进样平台不仅有在线微固相萃取（μSPE）功能，而且可以将μSPE与分析仪器联用，实现从固相萃取到GCMS进样的全过程自动化，大大提高了每天处理样品的数量。本文参考血液样品中有机磷的常规SPE-GCMS检测方法，使用LabTech AStation的在线μSPE进行血液前处理，并用GCMS进行检测，方法中检测的26种有机磷回收率为72.4%~111.0%，RSD 为2.1%~7.5%，符合血液中有机磷检测的要求。

关键词

AStation全自动多功能样品制备进样平台，微固相萃取μSPE，血液，有机磷  

1、主要设备及试剂

1.1 主要设备

AStation全自动多功能样品制备进样平台，莱伯泰科公司；

7890B-5977B气质联用仪，安捷伦公司

1.2 主要试剂

标样母液：26种有机磷标准物质，国家标准物质；

混标工作液：将26种有机磷标准物质配置成所有组分浓度均为1ug/mL的混标工作液；

甲醇（色谱纯， Fisher Chemical）；

二氯甲烷（色谱纯， Fisher Chemical）；

超纯水；

0.1mol/L pH6.0磷酸盐缓冲液 ；

ITSP小柱：Biotage Evolute ABN，10mg（填料性能相当于HLB）

2、测试过程2.1 样品预处理

取1mL血液样品，加入5mL 0.1mol/L pH6.0磷酸盐缓冲液，摇匀后，8000r/min离心30min，取上清液继续2.3、2.4处理。

2.2加标样品

取1mL血液样品，加入300μL，1μg/mL 26种有机磷混标工作液，再按2.1步骤进行样品预处理，取上清液作为加标样品进行后续处理。血液样品的加标浓度为0.3ug/mL。

2.3 GC-MS检测条件2.3.1 气相条件

色谱柱：HP-5ms  30m*0.25mm*0.25μm；

进样口温度：200℃，不分流进样：1min；

柱流速：1.5mL/min（恒流）；

进样量：1μL；

柱箱温度：60℃，保持0.5min，以70℃/min升温至100℃，以45℃/min升温至180℃，以20℃/min升温至200℃，保持6.5min，最后以45℃/min升温至280℃并保持6min。

2.3.2质谱条件

四极杆温度：150℃；离子源温度：280℃；传输线温度：290℃；

扫描模式：选择离子扫描（SIM），26种有机磷标准物质的主要特征离子参见表1，溶剂延迟时间：3min。

表 1 26种有机磷的出峰顺序及主要特征离子

2.4 在线μSPE-GCMS过程

按照图1所示的方法过程，结合2.3的气质条件对2.1及2.2的上清液进行在线μSPE净化-GCMS检测。

图1  在线μSPE-GCMS方法

3、测试结果3.1 26种有机磷混标SIM色谱图

图2为26种有机磷混标SIM色谱图。

图2  26种有机磷混标SIM色谱图

3.2 空白样品色谱图

图3为空白样品色谱图，空白样品在26种有机磷标样处均无检出。

图3  空白样品色谱图

3.3 加标样品色谱图

图4为加标样品的色谱图。

图4  加标样品色谱图

3.4 加标回收率

表2为6个加标样品的加标回收率结果， 26种有机磷的加标回收率在72.4%~111.0%，RSD 2.1%~7.5%。

表2 血液中26种有机磷回收率结果

4、结果与讨论

本方法采用在线μSPE-GCMS方法检测血液中的26种有机磷，回收率为72.4%~111.0%，RSD 为2.1%~7.5%，符合血液中有机磷检测的要求。

本文将客户的血液有机磷常规SPE-GCMS检测的方法，转移至LabTech AStation全自动多功能样品制备进样平台，实现了血液样品的在线全自动μSPE处理，并且与GCMS联用，实现了样品从固相萃取到GCMS进样全过程的自动化，大大提高了日处理样品数量。