2026-07-20 10:48:01, 芝士拉满 上海玮驰仪器有限公司
RIPTACs(调控诱导邻近靶向嵌合体)作为新一代邻近诱导蛋白调控技术,凭借“Hold and Kill”双重作用机制,在前列腺癌等实体瘤靶向药物研发中热度持续攀升。AR-RIPTAC-BRD4三元复合物的胞内形成效率,直接决定RIPTAC分子的细胞选择性与药效活性。
但传统Co-IP、工程化改造细胞实验以及体外生化结合实验,存在操作繁琐、难以高通量筛选、仅能检测过表达蛋白以及无法反映细胞内真实构象等痛点,因此内源蛋白水平的三元复合物的精准定量是研发难点。
瑞孚迪(Revvity)AlphaLISA™ SureFire®一体化技术平台,专为细胞内源性蛋白互作检测打造,为AR-RIPTAC-BRD4三元复合物表征提供均相、免洗、高通量、细胞级完整解决方案。
体外重组蛋白结合数据与活细胞真实互作差异极大,只有细胞内源性蛋白水平的三元复合物定量,才能真实评价RIPTAC先导化合物成药潜力;
三元复合物协同系数、形成浓度窗口、细胞亚环境稳定性,是化合物结构优化、linker改造、活性分级筛选的关键依据。
检测内源性蛋白,无需过表达
无需细胞转染标签蛋白,直接用药处理细胞、裂解后即可检测天然AR、BRD4通过RIPTAC桥接形成的三元复合物,最大程度还原生理病理真实状态。
全程均相免洗,实验周期大幅压缩
无洗涤、无孵育中转步骤,细胞处理→加样孵育→读板三步完成,整检测可在2小时内完成,完美适配高通量化合物筛选,支持自动化工作站批量运行。
CaptSure™抗干扰设计,细胞基质背景极低
采用专利CaptSure抗体捕获体系,规避血清、药物分子、细胞内源杂蛋白的非特异性干扰。检测信噪比高,支持肿瘤组织、全血样本检测。
将VCaP细胞接种于96孔板培养过夜,用1uM的AR/BRD4 RIPTAC处理细胞后,用裂解缓冲液在室温下振荡裂解细胞。使用AlphaLISA™ SureFire® Human AR/BRD4 Ternary Complex检测试剂盒(货号:ASBF-CARBR4-A500)检测细胞内AR/BRD4三元复合物的水平,RIPTAC化合物处理显著诱导了 细胞内AR-RIPTAC-BRD4三元复合物的形成。
VCaP cell line数据来源:Bioduro-Sundia(保诺-桑迪亚)
将LNCaP和22Rv1细胞接种于96孔板培养过夜,用200 nM的AR/BRD4 RIPTAC处理细胞后,用裂解缓冲液在室温下振荡裂解细胞。使用上述试剂盒检测细胞内AR/BRD4三元复合物的水平。如预期,RIPTAC化合物处理显著诱导了细胞内AR-RIPTAC-BRD4三元复合物的形成。
本案例展示的AR-RIPTAC-BRD4试剂盒只是典型应用代表,我们具备完善的产品矩阵与定制化服务能力,全面适配更多靶点组合的三元复合物研究:
丰富试剂盒储备
除AR、BRD4配对检测方案外,平台拥有大量已上市货号产品(可留言索要产品手册),覆盖转录因子、表观蛋白、激酶、癌蛋白、骨架蛋白等上百种热门靶点,可自由组合配对,快速搭建各类热门靶点介导的三元复合物检测体系。
靶点自由组合,自主搭配TP与EP
客户可完全根据自身项目需求,自主挑选目标捕获蛋白TP(Target Protein)与效应蛋白EP(Effector Protein),自由排列组合蛋白配对,灵活搭建专属RIPTAC、PROTAC、分子胶介导的三元复合物检测体系,高度贴合个性化课题设计。
从PROTAC到RIPTAC,蛋白邻近诱导药物正式进入精准细胞内时代,胞内内源三元复合物定量已经成为临床前药效评价的金标准实验。
瑞孚迪AlphaLISA™ SureFire®技术平台打通“细胞给药—内源互作定量—高通量筛选”全链条,不仅可标准化完成AR-BRD4靶向RIPTAC药物检测,更依托海量现货产品与灵活定制能力,支撑全类别靶点三元复合物研究,助力各类新型靶向疗法加速从实验室走向临床转化。
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