ArrayJet生物芯片点样仪助力慢性淋巴细胞白血病的蛋白标志物筛选

文章题目为“Tonic signaling of the B-cell antigen-specific receptor is a common functional hallmark in chronic lymphocytic leukemia cell phosphoproteomes at early disease stages”于2025年3月发表在Molecular Oncology杂志，作者来自于西班牙萨拉曼卡大学肿瘤研究中心。

在本研究中，19 例CLL样患者（18 例 B-CLL 和 1 例 CLL ）为研究对象。首先采集外周血（PB），流式细胞仪纯化 CD19⁺、CD5⁺的肿瘤 B 细胞，纯度 > 98%，冻存于液氮中备用。随后使用含尿素的裂解缓冲液（尿素、磷酸酶抑制剂等）裂解细胞，超声处理后离心收集上清液，并测定蛋白浓度。通过磷酸酪氨酸抗体免疫亲和法富集磷酸肽，使用质谱仪分析总蛋白和磷酸化肽段。蛋白组分析检测到 13,504 个独特肽段，对应 2,970 个蛋白质，其中 28 个为新发现蛋白；蛋白磷酸化分析鉴定到 594 个磷酸肽段，对应 316 个磷酸化蛋白，包括 55 个新发现磷酸肽段。英国ArrayJet生物芯片点样仪制备蛋白质芯片，检测磷酸化蛋白表达。将 208 种抗体（靶向 162 种蛋白）点印在氨基修饰的玻片上，随后孵育生物素标记的蛋白以及Cy5标记的链霉亲和素， 杂交后使用荧光芯片扫描仪进行荧光信号分析。

图1：实验流程，从蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学分析到亲和蛋白质组学（蛋白质微阵列）和WB验证。B-CLL： b细胞慢性淋巴细胞白血病；CLL：慢性淋巴细胞白血病；ESI-HCD：高能碰撞解离的电喷雾电离；（ESI）LC-MS /MS：液相色谱串联质谱；MBL：单克隆b细胞淋巴细胞增多症；PTM：翻译后修饰；WB,：western blot。

研究发现在2160个共表达蛋白中，有10%（220 个）发生了磷酸化，其主要参与 B 细胞激活和信号转导；BCR的 tonic 信号传导和 NF-κB/STAT3 通路是 CLL 和 MBL 磷酸化组的共同特征。55 个新磷酸肽的发现扩展了 CLL 磷酸化组数据库，为机制研究提供了可能的潜在靶点，并发现9 个磷酸化蛋白（如 BTK、SYK）与早期疾病阶段高度相关，可用于预后评估和治疗监测。整合多组学技术（质谱、蛋白质筛选芯片），提供了CLL蛋白质组和磷酸化组的全景图谱，为理解疾病异质性、开发新型生物标志物奠定了基础。

Arrayjet位于英国爱丁堡，专注于提供生物芯片应用领域的解决方案及服务。自2000年公司成立即致力于开发新型生物样品喷点方案–喷墨式液体处理平台，该系统于2006年上市，目前用户遍布全球27个国家。

Mercury系列产品采用独特的飞行喷墨点样技术实现行业第一的快速、非接触式微量液体处理。同时上万种不同样品可以进行快速点样，专利的上样模块配合高通量的点样喷头保障您的点样操作快速、无污染，更低的上样体积可有效减少样品损失，使您的珍贵样品物尽其用。

环亚生物科技有限公司

扫码关注我们

产品咨询  | 资料索取  

线上报修  |  简历投递