Moxi GO II:为单细胞测序的样本质控建立新标准——基于库尔特-荧光双模技术的快速流式解决方案

2026-03-24 14:57:23 环亚生物科技有限公司


在单细胞测序技术爆发式发展的今天,研究者们正以前所未有的分辨率探索细胞异质性,解密生命的微观奥秘。然而,这项被誉为“生命科学显微镜”的技术,却长期受困于样本制备的“第一道关卡”——如何精准把控细胞浓度、活率、纯度等关键参数。美国Orflo Technologies的快速流式细胞仪Moxi GO II(图1),以库尔特-荧光双模技术重构单细胞测序质控标准,成为科研路上的“可靠同行者”。

图1 Moxi GO II



单细胞测序的“隐形门槛”,Moxi GO II轻松跨越


单细胞测序的魅力在于捕捉单个细胞的独特基因表达图谱,但样本的微小性(单个细胞RNA易降解)、复杂性(细胞异质性)和敏感性(批次效应影响大),让样本制备成为决定实验成败的“生死线”。传统检测方法或依赖成像计数(仅测几百个细胞,统计偏差大),或受激光散射影响(粒径测量失真),难以满足单细胞测序对“高精度”的严苛要求。

Moxi GO II的出现,为这一困境带来了突破性解决方案。它创新性融合库尔特原理与荧光流式检测技术,从根本上革新了细胞分析逻辑:

库尔特原理的“三维透视眼”(视频):


通过测量细胞通过小孔时的电阻变化,实现对细胞的逐个三维测量,不仅精准计数(几秒钟内计数4万个细胞,远多于成像类的几百个),更能捕捉真实粒径分布,不受样本颜色、浓度干扰,数据可靠性较传统方法提升数倍。

 库尔特原理视频

荧光检测的“火眼金睛”(图3):


配备488nm激光与双PMT荧光通道,基于PI染料的活率检测灵敏度与大型流式细胞仪相当,CV值(变异系数)极低,准确性远高于成像系统,让“活细胞比例”这一关键指标无可争议。

图3 荧光检测图解


从样本到数据,Moxi GO II的“全链条守护”


单细胞测序的样本制备涉及细胞分离、纯化、质控等多个环节,Moxi GO II以“多面手”能力覆盖全程,成为科研人员的“质控管家”:

1. 细胞计数与活率:让“数量”与“质量”一目了然


在单细胞测序中,细胞浓度过高易导致油滴包裹多个细胞,过低则浪费试剂——Moxi GO II几秒钟内即可完成精准计数,CV值低于传统系统(如图4所示,计数CV值极低,准确性远高于成像系统和血球计数板),确保每个油滴只捕获一个细胞。同时,其活率检测能精准区分死活细胞,避免死细胞释放的游离核酸干扰测序结果。

图4 不同检测系统的计数和活率检测CV值

2. 粒径分析:揪出“隐藏的干扰者”


细胞聚集、碎片污染是单细胞测序的常见隐患。Moxi GO II的超高分辨率粒径分析(可区分4.1μm、6μm、7.9μm等不同微珠),能清晰识别聚集细胞(如图5中HEK-293细胞聚集状态)和小颗粒碎片(如图6中“不健康”细胞的小颗粒增加),帮助研究者在实验早期剔除不合格样本。

图5 聚集和非聚集样本结果叠加比较

图6 健康和不健康样本结果叠加比较

3. 样本纯度与表型:让“目标细胞”无处可藏


无论是PBMC样本中的红细胞污染(图7中通过粒径门控计算RBC“污染”程度),还是磁珠纯化后的细胞纯度验证(图8中单核细胞与PBMC的粒径差异),Moxi GO II都能通过粒径+荧光双维度分析轻松完成。更支持细胞表型分析(如CD3/CD8双标记检测,图9),为分选后纯度验证提供直接证据。

图7 PBMC纯度,RBC污染

图8磁珠纯化

图9 细胞表型分析

4. 细胞核计数:挑战“微小样本”的精准测量


当样本为细胞核(直径仅4-9μm)时,传统成像计数仪常因分辨率不足误判,而Moxi GO II可分辨低至3μm的颗粒,结合PI染色轻松实现细胞核精准计数(图10中裂解前后细胞核计数一致),为核测序提供可靠数据。

图10 细胞核计数

科研力证:从耳蜗到皮肤,Moxi GO II的单细胞测序“多领域信任”


Moxi GO II的准确性、可靠性等已被众多顶级科研团队验证,成为单细胞测序研究的有力工具: 

——小鼠耳蜗衰老研究中(Protein & Cell, 2023,https://doi.org/10.1093/procel/pwac058),中国科学院动物研究所的研究团队用其精确测量耳蜗细胞浓度,为单细胞转录组分析提供稳定起始样本;

——探索槲皮素促进毛发生长机制时(Protein & Cell, 2023,https://doi.org/10.1093/procel/pwac062),首都医科大学宣武医院的研究人员通过Moxi GO II监测毛囊细胞活率与增殖状态,为“血管-毛囊”互作研究奠定基础;

——解析急性肾损伤中的淋巴内皮细胞异质性(bioRxiv, 2024,https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380),其高分辨率粒径分析帮助德克萨斯A&M大学医学院的研究人员区分不同亚型淋巴内皮细胞,确保测序数据的特异性;

——人类皮肤衰老的单细胞图谱构建中(Developmental Cell, 2021,https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002),Moxi GO II的快速检测能力加速了样本周转,助力中国科学院动物研究所团队捕捉皮肤细胞的动态变化。


不止于“精准”,更在于“易用”:让每个实验室都能轻松驾驭


对于忙碌的科研人员而言,仪器的“友好度”同样关键。Moxi GO II设计之初便以“化繁为简”为目标:  

  • 开机即用:无需预热,触屏操作,预设程序覆盖常见检测需求,新手也能秒上手;  

  • 快速输出:10秒内给出结果,大幅缩短样本等待时间;  

  • 维护省心:无需复杂清洁,小巧机身节省实验室空间;  

  • 灵活兼容:支持Annexin V-FITC、PE、PI等多种染料(见表),适配活率、凋亡、转染效率等多种检测场景。


总结:

单细胞测序技术独特复杂,成本昂贵,因此样本处理制备就显得尤为重要,是下游实验成败的基础。Orflo Technologies的Moxi GO II系统非常适用于细胞样本的全程监测。 Moxi GO II采用库尔特原理进行细胞计数和粒径测量,同时采用488nm激光光源,结合两个PMT通道,525/45nm通道和561nm/LP(或者646nm/LP,可根据需要更换),进行细胞活率、细胞凋亡、转染效率、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式检测。

仪器设计小巧轻便,无需预热,开机即用,预设程序,触屏操控,运行后10秒即可给出测试结果,使用后也无需清洁维护。Moxi GO II功能多样,简单易用,为广大研究者提供了一个非常实用的检测工具。通过Moxi GO II,无论是经验丰富的流式专家,还是初试身手的实验小白,都可以轻松完成实验。




美国Orflo Technologies公司是一家非常专业的细胞分析仪器研发和制造企业,拥有多项专利技术,产品以库尔特原理的高精细胞计数仪和超快流式细胞仪为主。作为中国地区独家代理,环亚生物科技有限公司全权负责Orflo Technologies产品在中国地区的推广、销售,为广大用户提供专业的技术咨询和产品服务。

环亚生物,生命科学产品全国性代理商,不断把国外顶级的创新产品引入中国。环亚生物具备完善的公司运营、产品管理、营销、售前技术支持和售后维修体系。

文中所用文献全文链接:

1.https://doi.org/10.1093/procel/pwac058

2.https://doi.org/10.1093/procel/pwac062

3.https://doi.org/10.1101/2023.06.09.544380

4.https://doi.org/10.1016/j.devcel.2020.11.002



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