显微课堂 | Drosophila（果蝇）研究显微镜使用指南

使用显微镜的进行典型果蝇

相关实验操作步骤

向胚胎显微注射DNA进行基因改造（转基因）。

通过观察解剖特征对果蝇进行基本分类的 "拣蝇法"。

荧光筛选，例如观察胚胎或幼虫，找出成功转染荧光蛋白的胚胎或幼虫。

用于研究大脑或其他解剖结构的解剖案例。

在实验过程中对筛选出的果蝇（活体和固定的）或解剖结构进行成像和记录。

显微注射转基因

显微镜物镜下有足够的空间放置微型注射器。

视野小限制了同时观察胚胎的数量。

伤害胚胎的风险。

在进行注射时保持舒适，因为注射需要重复动作，可能需要几个小时。

视野大，可同时看到多个胚胎。

配件使显微镜更符合人体工程学，最大限度地减少用户的疲劳和劳损。

与市面上的显微操作设备兼容。

拣蝇

一些细节可能难以观察到。

小视场限制了同时观察到的果蝇数量。

既要有足够高的放大倍率来观察解剖细节，又要有足够大的景深来将果蝇按（分类）到不同的组中。

用于麻醉果蝇的CO₂（二氧化碳）垫对底座来说太大，存在风险。

FusionOptics技术可同时实现更高的分辨率和更大的景深。

更舒适的设置，减少疲劳和劳损，采用人体工程学模块。

使用中等大小的底座或摇臂支架，为二氧化碳垫留出足够的空间。

荧光筛选

信噪比（SNR）过低导致分辨率不足，从而难以分辨不同表型的细微差别。

通常情况下，分辨率和景深之间存在折衷关系。

果蝇及其食物发出的自发荧光。

长时间使用显微镜时保持舒适。

利用TripleBeam技术降低荧光背景噪声，提高信噪比。

得益于FusionOptics技术，可同时获得高分辨率和大景深效果。

利用计算清除功能，即使是胚胎或幼虫深处的细节也能清晰地显示出来。

多种对比方法和专门设计的反射镜，配备Leica透射光底座，可减少自发荧光。

使用人体工程学模块，用户可以舒适地工作，减少疲劳和劳累。

解剖

标本小而易碎，因此很难看到内部结构。

在大脑解剖过程中，应避免与空气接触。

实现速度和精度都很困难。

在溶液中解剖果蝇时的反光。

利用体视显微镜轻松确定蝇类标本的三维方向。

采用人体工程学模块，工作舒适，减少疲劳和劳累。

使用偏振镜和各种照明选项可以大大减少溶液表面的反射。

成像和文件

避免蝇类标本因光和热的照射而受损，尤其是在实时成像过程中。

标本移出视野。

由于光散射的原因，在对厚结构或标本深处的结构成像时，会出现焦外模糊的情况。

获取3D标本的对焦2D图像。

使用高帧频、高灵敏度的显微镜相机记录快速事件。

借助计算清除功能，快速查看果蝇标本深处的细节。

使用宽场显微镜对果蝇标本进行更柔和的光照射。

利用扩展景深 (EDOF) 成像技术获取整个Z叠的同焦图像。

利用光片和共聚焦显微镜获得更高分辨率的果蝇标本图像。

徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪，作为德国著名的光学制造企业，徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史，逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用，并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。

徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系，不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门：生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有9大产品研发中心与4大生产基地，在二十多个国家设有销售及服务分支机构，总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。