相分离培训班活动回顾，从概念到实操的全链路体验

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王亮老师围绕“从概念到证据”的闭环展开六讲：从无膜区室的发现到相分离的物理驱动力，再到体外重构、活细胞识别、功能解析与机制验证，帮助学员把“现象”转成“可量化证据”。在方法部分，他明确体外重构的目标与步骤，并示范相图绘制、FRAP、沉降及微流变/SAXS等表征；活细胞环节强调定量成像与参数记录，避免仅停留在“好看的图片”。功能案例涵盖FOXA1开启染色质、RNA 3′末端加工，以及超级增强子处BRD4/MED1的相分离等，而且还展示了凝聚体如何影响转录与加工，最终形成从原理到应用的清晰闭环。

高老师先以《相分离与超级增强子研究前沿及课题设计》为主线，用通俗例子讲清超级增强子概念与价值；再示范如何用H3K27ac/BRD4/MED1等标记配合ROSE完成定位与注释。随后在《蛋白相分离预测与ACC-seq筛选技术应用》中结合ACC-seq快速筛出候选蛋白。把成像、表达与功能数据串成验证闭环，并给出可直接执行的选题路线：预测→构建→多组学→功能评估。

在《相分离研究中的共聚焦成像平台应用》报告中，黄晖老师聚焦于如何高效利用显微成像技术。她从光学系统与物镜选择出发，解析了多色成像、三维快速采集及去卷积算法的应用场景，并强调元数据记录与质控的重要性，让学员认识到成像不只是“拍照”，而是科研数据的核心组成部分。

洪老师的报告《Gene tagging原位插入与邻近标记技术应用》指出三大难点：互作弱、瞬态、过表达易致假象；解释内源敲入的优势与常见标签选用；梳理 BioID、TurboID、APEX2 的适用场景与时效对比；并以 YTHDC1、KAT8-IRF1 及应激颗粒为例，展示从敲入构建、邻近标记、蛋白富集到 LC-MS/MS 鉴定和通路分析的流程，给出“敲入联用邻近标记与蛋白组学”的落地路线。

在《质谱技术驱动的蛋白质组研究与应用》课程中，方晶晶老师带领学员走进了质谱的世界。他以“谁在液滴里、它们在做什么”为核心问题，展示了蛋白质组学从样本制备、分离到数据检索与定量分析的全流程，并通过实际案例演示了互作网络和通路富集如何与显微结果互证。在随后的现场展示中，她更是把复杂的数据处理过程拆解成清晰的步骤，让学员直观感受到质谱在相分离研究中的力量。

除了理论课程，本次培训的另一大亮点是两场沉浸式实验操作，让学员真正“动手做、带成果”。

在培训专家的指导下，学员们先进行了“蛋白成像条件摸索”，学习如何通过缓冲体系、盐浓度和拥挤剂等条件快速筛选最佳液滴形成环境。随后，在FRAP实验中，大家直观体验了动力学参数获取与材料态判断的方法，并最终通过结果展示环节掌握了从数据到报告的完整逻辑。

培训进入活细胞成像与细胞内FRAP环节。导师们示范了如何进行二维和三维活细胞成像设置、如何设定FRAP采集参数，并通过实例讲解了FRAP数据分析的关键步骤和细节。学员们在实验台前一步步完成操作，从镜头下的实时图像到最终的统计曲线，每一步都加深了对理论知识的理解。