【热点】Aeris Peptide XB-C18——用于司美格鲁肽相关杂质分析的应用研究

2025-08-19 09:59:19, 市场部飞诺美

司美格鲁肽（Semaglutide）

司美格鲁肽（Semaglutide）是一种胰高血糖素样肽-1（GLP-1）受体激动剂，用于治疗2型糖尿病和肥胖症。其作用机制包括增加胰岛素分泌、降低胰高血糖素水平以及延缓胃排空。这些作用共同改善了血糖调节并促进体重减轻。该药物模拟了内源性激素GLP-1的效应，该激素负责调控食欲和葡萄糖代谢。

在司美格鲁肽的生产过程中，由于其相关肽类杂质结构复杂，杂质分离颇具挑战。这些杂质通常包括D-氨基酸异构体、截短序列、氧化或还原形式，以及由脱酰胺化、磷酸化和酰基化等反应产生的其他杂质。为了有效分离这些杂质，通常需要系统化的分离方法和仔细筛选的色谱柱固定相。由于众多肽类杂质结构高度相似，必须增强保留能力和选择性才能加以区分。

在本应用中，我们利用 Aeris Peptide XB-C18建立了一套可靠的 HPLC分析方法，用于对司美格鲁肽及其八种已知相关杂质进行定量分析。该色谱柱专为基于肽类的分离而设计。其XB-C18 配体具有二异丁基侧链，形成了一种键合均匀的固定相。相对于传统 C18 固定相，其配体间距增大，这使得更长（>20 个残基）的肽类能与固定相进行更有效的相互作用。此外，其核-壳颗粒形态最大限度地减少了分析物的扩散，从而使色谱峰更尖锐，以便提供出色的分离度和峰形。

实验部分

• 司美格鲁肽对照品溶液：1.0mg/mL（乙腈:水=50:50 v/v）

• 杂质对照品溶液：1.0mg/mL（乙腈:水=50:50 v/v）

• 加标溶液：以1.0mg/mL的司美格鲁肽对各杂质按0.2%, 0.5%, 1%, 2%进行加标

表1. 各杂质序列信息

图1. 司美格鲁肽结构信息

色谱条件

• 色谱柱：Aeris peptide XB- C18 (150 x 4.6 mm, 2.6μm货号: 00F-4505-E0)

• 流动相A：100mM磷酸二氢铵缓冲液：乙腈=90：10（含0.1mL 70%的高氯酸）

• 流动相B：乙腈：甲醇：水=60：30：10（含0.1mL 70%的高氯酸）

• 流速：0.6 mL/min

• 进样体积：5μL

• 柱温：25℃

• 波长：210 nm

• 梯度程序

图2. Overlayed chromatogram of blank and Semaglutide standard spiked with known impurities at 1.0 % level on Aeris Peptide XB-C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

图3. Overlayed chromatograms of individual impurities on Aeris Peptide XB-C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

图4. Overlayed chromatograms of replicate injections (N=6) of sample spiked with 0.5 % of known impurities on Aeris Peptide XB-C18

图5. Overlayed chromatograms of Semaglutide standard spiked with known impurities at 0.2 %, 0.5%, 1 % and 2 % levels on Aeris Peptide XB-C18

本文建立了一种采用反相高效液相色谱法（HPLC），用于定量分析司美格鲁肽及其相关杂质。使用 Aeris Peptide XB-C18 色谱柱（150 × 4.6 mm，2.6μm）对方法进行开发优化，改善了各杂质之间的分离度，以实现对司美格鲁肽所有有关物质的定量分析。所有已知和未知杂质均与司美格鲁肽主峰达到良好分离。显示出可重现的结果，表明其精密度令人满意。这为药物研究人员开发司美格鲁肽的分析方法提供了有力的参考。

关于Aeris™ 蛋白质和

多肽分析核-壳液相色谱柱

Aeris 是一款反相核-壳 HPLC/UHPLC 色谱柱，专为蛋白质和多肽超高性能分离与分析而设计。

• XB-C18 固定相特别适合分离多肽

• 1.7 μm、2.6 μm 和 3.6 μm 颗粒可用于为 HPLC 和 UHPLC 系统间的方法开发提供灵活性

• 5 μm 颗粒适用于多肽纯化

• 小孔颗粒有利于分析物扩散