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TA克隆技术(TA cloning)利用Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3-5端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3端加上一个非模板依赖碱基“A”。pMD18-T是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在Xba I和Sal I识别位点间插入一个EcoR V位点,然后用EcoR V进行酶切使质粒线性化,并在它的3端添加“T”构建而成。因其3端带有一个突出的“T”尾,能高效地与带“A”尾的PCR产物连接,极大地提高了克隆的效率。TA克隆是目前克隆PCR产物zei简便、快捷的方法。
pMD18-T载体结构图 TA克隆原理图
pMD18-T载体结构图
提供结果
1. 高纯度质粒,大约2 μg DNA,OD值在1.8~2.0之间
2. 含有重组质粒的甘油菌
3. 测序原始图谱和序列
4. 去载体后的序列
5. 要求测通的样品则提供拼接序列
TA克隆,
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